用途:用于李斯特氏菌的顯色培養,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環
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用途:用于李斯特氏菌的顯色培養,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環
李斯特氏菌顯色培養基可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結果可在 3 天內檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍色,菌落周圍有一不透明環。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。
成份 (g/L)
基礎培養基:
營養物質 | 70.0 |
顯色劑 | 1.0 |
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃ |
李斯特氏菌添加劑 6.0g
李斯特氏菌抑菌劑 1 1ml*5 支
李斯特氏菌抑菌劑 2 1ml*5 支
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
用法
稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環。
貯存
制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
使用前,把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。
1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液;
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養 48 小時;或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養 24 小時。
3 、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上, 37 ℃培養 24-48 小時。
質量控制
1 、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。
2 、微生物試驗
在 37 ℃培養 24-48 小時:
質控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 | 不透明環 |
單增李斯特氏菌 | 27853 | +++ | 藍色 | + |
綿羊李斯特氏菌 | +++ | 藍色 | + | |
西爾李斯特氏菌 | +++ | 藍色 | - | |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | ++ | 黃色 | - |
大腸桿菌 | 25922 | - | - | - |
沙門氏菌 | - | - | - |
典型特征
單增李斯特氏菌 37 ℃培養 24-28 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養 48 小時 ,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養 24-48 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
一、細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
2. 細胞污染問題,請在收到產品48小時內,給我們提出真實的實驗結果,核實后重發;
3. 常溫發貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后,絕大多數細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態照片),重發;
4. 干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現污染,重發;
5. 細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發;
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發。
二、細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發;
2. 客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
3. 非本庫推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
4. 細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
5. 細胞培養時經其它處理的,不重發;
6. 細胞收到2天內,未告知,不重發;
7. 視具體情況而定。
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