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李斯特氏菌顯色培養基

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 用途:用于李斯特氏菌的顯色培養,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環

李斯特氏菌顯色培養基可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結果可在 天內檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍色,菌落周圍有一不透明環。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。

成份 (g/L)

基礎培養基:

營養物質 70.0
顯色劑 1.0
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃

李斯特氏菌添加劑 6.0g

李斯特氏菌抑菌劑 1 1ml*5 支

李斯特氏菌抑菌劑 2 1ml*5 支

此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。

注意

此培養基僅供實驗室使用。

用法

稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環。

貯存

制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃

失效

干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

操作步驟

使用前,把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。

1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液;
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養 48 小時;或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養 24 小時。
3 、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上, 37 ℃培養 24-48 小時。

質量控制

1 、外觀

此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。

2 、微生物試驗

在 37 ℃培養 24-48 小時:

質控菌株 ATCC 生長情況 菌落顏色 不透明環
單增李斯特氏菌 27853 +++ 藍色 +
綿羊李斯特氏菌   +++ 藍色 +
西爾李斯特氏菌   +++ 藍色 -
金黃色葡萄球菌 25923 ++ 黃色 -
大腸桿菌 25922 - - -
沙門氏菌   - - -

典型特征

單增李斯特氏菌 37 ℃培養 24-28 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養 48 小時 ,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養 24-48 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。

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