蠟樣芽孢桿菌顯色培養基是改良的培養基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蠟樣芽孢桿菌的快速檢測。改進型顯色劑和添加劑,特異性和靈敏度明顯提高。蠟樣芽孢桿菌顯藍綠色且菌落周圍有一不透明環,其它菌顯藍綠色、黃色或無色,革蘭氏陰性菌被抑制。
成分(g/L)
特殊營養物質 | 20.0 |
顯色劑 | 0.5 |
抑菌劑 | 4.0 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.0±0.2 25℃ |
蠟樣芽孢桿菌添加劑 3.0g(已配套,無需另購)
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
用法
稱取基礎培養基 7.95g,加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 0.6g 蠟樣芽孢桿菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動 5-10min,使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌 15min。冷至 45-50℃左右時,把蠟樣芽孢桿菌添加劑加入基礎培養基中, 輕輕混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 1-2mm,這樣有利觀察不透明環。
操作步驟
1、按 GB 標準、SN 標準、FDA 標準或其它方法制備樣品液;
2、樣品液在 30±1℃ 增菌培養 18-24 小時;
3、取增菌液劃線接種于蠟樣芽孢桿菌顯色培養基平板上,36±1℃ 培養 18~24h。蠟樣芽孢桿菌典型菌落為藍綠色且菌落周圍有一不透明環。若 24 小時沒有出現典型菌落,可延長培養至 48 小時;
4、對可疑蠟樣芽孢桿菌可劃線接種到營養瓊脂平板上,30±1℃ 培養 18-24 小時,挑取單菌落做蠟樣芽孢桿菌全套生化試驗。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈不透明無色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36±1℃ 培養 18~24h 小時:
質控菌株 | 菌株號 | 生長情況 | 菌落顏色 |
蠟樣芽孢桿菌 | CMCC63303 | +++ | 深藍色且菌落周圍有一圈不透明環 |
蠟樣芽孢桿菌 | ATCC11778 | +++ | 藍綠色,菌落比較大,扁平,且菌落周圍有一圈不透明環 |
枯草芽孢桿菌 | CMCC63501 | ++ | 白色,菌落周圍沒有不透明環 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC25923 | -/+ | 白色 |
大腸桿菌 | ATCC25922 | - | 白色 |
方法的局限性
本培養基鑒定蠟樣芽孢桿菌,有時可能會出現假陽性,需做其它補充試驗。蘇云金芽孢桿菌在本培養基上顯色與蠟樣芽孢桿菌相同,但食品中一般很少。
典型特征
蠟樣芽孢桿菌典型菌落為藍綠色,菌落周圍有一不透明環
貯存
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。