pBM21快速克隆試劑盒為一種陽(yáng)性選擇克隆系統(tǒng)，克隆區(qū)域位于pBM21質(zhì)粒的**基因（lethal gene）內(nèi)部。當(dāng)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌后，有外源片段的插入的重組質(zhì)粒導(dǎo)致載體上的**基因功能喪失，細(xì)菌存活，無片段連接（載體自連）時(shí)，**基因表達(dá)的毒蛋白使細(xì)菌不能存活。該試劑盒利用T4 DNA 連接酶（T4 DNA ligase）的連接活性將平末端DN**段克隆到具有磷酸化末端的線性化載體pBM21中。
適用于克隆由Pfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的平末端PCR產(chǎn)物或各種方法產(chǎn)生的平末端雙鏈DN**段。由Taq、Tth和klenTaq等DNA聚合酶擴(kuò)增的非平末端PCR產(chǎn)物，可通過平末端化酶（Blunting Enzyme）處理成為平末端DNA用于連接。陽(yáng)性克隆可以用試劑盒提供的引物PBM21F和PBM21R進(jìn)行菌落PCR或測(cè)序鑒定。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、連接反應(yīng)僅需5-30分鐘；
2、適用于平末端PCR產(chǎn)物和平末端雙鏈DN**段；
3、適用于磷酸化或非磷酸化的DN**段；
4、pBM21為氨芐抗性，具高拷貝復(fù)制起始子。
產(chǎn)品信息：
| 組分 | 數(shù)量20T | 數(shù)量20T×3 |
| pBM21 Vector (40ng/ul ) | 20ul | 20ul×3 |
| 2×T4 DNA ligase master mix | 100ul | 100ul×3 |
| Blunting Enzyme | 20ul | 20ul×3 |
| Control Insert | 5ul | 5ul |
| PBM21F Primer | 0.1OD | 0.1OD ×3 |
| PBM21R Primer | 0.1OD | 0.1OD ×3 |
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