產品及特點 柑橘黃龍病菌亞洲種（Candidatus Liberobacter Asiaticus）是一種類菌體，柑橘感染黃龍病后，全年均可發(fā)生，一般以夏梢和秋梢發(fā)病最多，其次是春梢。新梢的癥狀是葉片表現黃化和黃綠相間的斑駁。在葉片凋落后，枝梢上新長出的葉片表現缺素狀的花葉。病梢變短、生勢衰弱，病葉黃厚、變小，且易脫落，形成枯枝。開花不適時，花開的多、落得多。果小而畸形，或紅鼻果。后期，根部往往表現為小根腐爛。此菌可以侵染蕓香科柑橘屬和金橘屬植物，引發(fā)癥狀。通過菟絲子，此菌可以侵染長春花。在自然界，蕓香科蠔殼刺屬和木蘋果屬植物可能受此菌侵染，九里香屬植物常見著生大量傳播柑橘黃龍病的柑橘木虱，但其體內未見病原菌。
本產品是根據 PCR 原理開發(fā)的柑橘黃龍病菌亞洲種的檢測試劑盒，它具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。
2.引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴柑橘黃龍病菌亞洲種，與其他病原沒有交叉反應。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分
成 份 編號 十孔盒包裝
PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL（紅蓋）
超純水 100935 1 mL（亮黃色）
柑橘黃龍病菌亞洲種 13-5300yw 100 μL（白蓋）
PCR 引物混合液
柑橘黃龍病菌亞洲60908-5300pc 50 μL（黃蓋）
種 PCR 陽性對照
（1×10E8 拷貝/μL）
運輸及保存 ：低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法
一、樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。
2.如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 柑橘黃龍病菌亞洲種 PCR 陽性對照的 10000
倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應（40μL 體系）
3.對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：
|
| 成分 | N+2 個 | PCR 陰性 | PCR 陽性 |
|
|
| 樣品管 | 對照 | 對照 |
| |
|
|
|
| |||
|
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| 柑橘黃龍病菌亞洲種 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
|
|
| PCR 引物混合液 |
| |||
|
|
|
|
|
| |
|
| N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| PCR 陰性對照（水） | - | 18 μL | - |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| PCR 陽性對照（柑橘黃龍 |
|
|
|
|
|
| 病菌亞洲種 PCR 陽性對 | - | - | 18 μL |
|
|
| 照的 10000 倍稀釋液） |
|
|
|
|
|
|
|
|
| | |
4. 按下表設置 PCR 反應：
| 過程 | 溫度 | 時間 |
|
|
|
|
|
|
| 預變性 | 95℃ | 5 min |
|
|
|
|
|
|
| PCR 反應 | 95℃ | 30 sec |
|
|
|
|
| |
| 55℃ | 30 sec |
| |
| （35 個循環(huán)） |
| ||
|
|
|
| |
| 72℃ | 30 sec |
| |
|
|
| ||
|
|
|
|
|
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
|
|
|
|
| |
|
|
三、電泳檢測
3.取 10-20 μL PCR 產物。2%瓊脂糖凝膠電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。陽性對照必須有 237bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
我要詢價
*聯系方式：
(可以是QQ、MSN、電子郵箱、電話等，您的聯系方式不會被公開)
*內容：
