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使用目的：本試劑盒用于測定樣本中蛋氨酸(Methionine)的含量。實驗原理本試劑盒應用酶聯免疫競爭法測定標本中蛋氨酸(Methionine)水平。用純化的蛋氨酸(Methionine) 抗 體 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 體 ， 往 包 被 單 抗 的 微 孔 中 加 入 蛋 氨 酸(Methionine)，和 HRP 標記的蛋氨酸(Methionine)抗原，使它們競爭結合，，經過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的蛋氨酸(Methionine)的含量呈負相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中蛋氨酸(Methionine)的含量。標本要求1．標本處理：（1）水樣采集后經 -20℃反復凍融三次，再經玻璃纖維過濾后，備查（2）組織樣品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相關文獻提取進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，備查2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1. 加樣：分別設標準孔、空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加 50 微升，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品最終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。2. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復 5 次，拍干。6. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.7. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。8. 測定：以空白孔調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。計算以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在 5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值大于標準品孔第一孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。檢測范圍：10 pg/mL -500 pg/mL規格：96 人份/盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 個月
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