注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒測定意義：
土壤總磷包括有機磷和無機磷，其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷，可以全面反映土壤磷營養(yǎng)狀況。
測定原理：
利用鉬藍法定磷。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機磷含量；另外取一份土樣，經(jīng)高溫灼燒后，土壤有機磷轉(zhuǎn)化為無機磷，測得土壤總磷含量；總磷含量減去無機磷含量，即可計
算出有機磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、臺式離心機、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐、蒸餾水、100 目篩子（可更小）。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。 臨用前用蒸餾水稀釋10倍后再用。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入8mL蒸餾水，充分溶解后加入4mL試劑二，混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20μmol/L 無機磷標(biāo)準(zhǔn)品，4℃保存。
土壤不同形態(tài)磷提取：
1.無機磷：稱取通過100目篩子的風(fēng)干土樣0.01g，轉(zhuǎn)移到1mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃離心10min，取上清液一，用于無機磷含量測定。
2.總磷提取：取通過100目篩子的風(fēng)干土樣，550℃灼燒 1h，冷卻后稱取約0.01g，轉(zhuǎn)移到1mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃離心10min，取上清液二，用于總磷含量測定。
測定步驟：
1.分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到660nm，蒸餾水調(diào)零。
2.打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3.空白管：取EP管，依次加入100μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm 測定吸光度，記為A空白管。
4.標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液，90μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min 后于660nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5.測定管：取EP管，依次加入10μL上清液一或者上清液二，90μL蒸餾水，100μL試劑三，
混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
