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土壤酸性磷酸酶活性測定試劑盒

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 產品簡介:

    土壤酸性磷酸酶活性測定試劑盒土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響,根據最適pH范圍,通常分為酸性、中性和堿性三種類型。酸性環境中,S-ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計算出S-ACP活性。

產品內容:

試劑一:液體×1瓶,4避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體×1瓶,4保存。

試劑四:粉劑×1瓶,4避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇(自備),48 μL蒸餾水充分溶解。(變褐色后不能再使用)

標準品:液體×1瓶,0.5 μmol/mL苯酚標準液,4保存。

操作步驟:

一、粗酶液提取   

稱取風干混勻土壤約0.1g,加入0.05mL甲苯(自備),輕搖15min;加0.4 mL試劑一并且搖勻后,置于37恒溫培養箱,開始計時,催化反應24h;到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應。8000rpm25離心10min,取上清液置于冰上待測。

二、測定步驟

1. 分光光度計預熱30 min以上,調節波長到660 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL蒸餾水100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

3. 標準管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL標準液100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A標準管。

4. 測定管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL上清液100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

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