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土壤纖維素酶(S-CL)測試盒

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 正式測定前務必取 2-3個預期差異較大的樣本做預測定

土壤纖維素酶(Solid-cellulase,S-CL)活性測定試劑盒測定意義:

S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。

測定原理:

采用3.5-二硝基水楊酸法測定S-CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:甲苯 10mL×1 瓶,4℃保存;(自備)

試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

加樣表和測定步驟:

 

對照管

測定管

風干土樣(g)

0.25

0.25

試劑一(μL)

125

125

 

煮沸15min(蓋緊)

振蕩混勻,室溫放置15min

試劑二(μL )

250

250

試劑三(μL )

1000

1000

蒸餾水(μL )

250

250

振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),得糖化液

糖化液(μL)

50

50

試劑四(μL)

150

150

混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻

蒸餾水(μL)

1050

1050

混勻,550nm 處蒸餾水調零,測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管

 

S-CL 活力計算:

標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.3356x - 0.012;x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值。

單位的定義:每天每 g 土樣中產生 1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

S-CL 活力(mg/d/g)=(ΔA+0.012) ÷0.3356×V 反總÷W÷T =465×(ΔA+0.012)

 

T:反應時間,1h=1/24d; V 反總:反應體系總體積:1.625mL;W:樣本質量,0.25g。

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