注意:正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。
土壤羥胺還原酶試劑盒測定意義
土壤硫對農林畜牧具有重要作用,環境中許多污染物都是含硫化合物,通過大氣傳輸沉降到土壤中,對生態系統產生一定的影響,土壤中的硫可被植物吸收利用。
測定原理
利用硫酸鋇比濁法測定。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀。
試劑組成和配制
酸性土壤提取液:液體 55mL×1 瓶,4℃保存。
堿性土壤提取液:液體 55mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 1mL×1 支,4℃保存。
試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 20mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
樣本處理
新鮮土樣風干,過20目篩,按照土壤質量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
測定操作表
| 空白管 | 測定管 |
樣本(μL) |
| 200 |
提取液(μL) | 200 |
|
試劑一(μL) | 20 | 20 |
90℃開蓋消煮 5min,取出自然冷卻 | ||
試劑二(μL) | 200 | 200 |
試劑三(μL) | 400 | 400 |
試劑四(μL) | 200 | 200 |
充分混勻,25℃震蕩 20min | ||
于1mL玻璃比色皿,蒸餾水調零,測定440nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管 |
計算公式
標準曲線:y =0.0112x+0.0377,R2=0.9976
有效硫含量(mg/kg)=(△A-0.0377)÷ 0.0112×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 446.43×(△A-0.0377)÷W
V 反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質量,g
注意事項
1. 酸性和堿性土壤提取液不一樣,提取前必須確認土壤的酸堿性,加入對應的提取液。
2. 90℃消煮必須開蓋,使試劑一完全散出。