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植物根系活力檢測試劑盒(萘胺比色法)

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產品簡介∶

植物根系是活躍的吸收器官和合成器官,根的生長情況和代謝水平即根系活力直接影響植物地上部的生長和營養狀況以及最終產量,是植物生長的重要生理指標之一。植物根系活力(根系脫氫酶活性)可以采用TTC還原、萘胺氧化和甲烯藍吸附等方法測定。根系能氧化萘胺生成紅色的萘胺化合物,根系對萘胺的氧化能力與其呼吸強度有密切聯系。

植物根系活力檢測試劑盒(萘胺比色法)檢測原理是在弱酸性條件下,以萘胺為底物,萘胺與對氨基苯磺酸、亞硝酸鹽作用生成穩定的紅色偶氮化合物,可以根據根系表面著色深淺,通過分光光度計510nm檢測溶液中未被氧化的萘胺的量,以定量測定根系活力。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料∶

1、蒸餾水

2、電子天平、計時器

3、濾紙、離心管或試管

4、恒溫箱或水浴鍋

5、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)∶

1、配制萘胺標準(50ug/ml):按萘胺標準(5mg/ml)∶蒸餾水=1∶99混合,即為萘胺標準(50ug/ml); 4℃保存,1個月內有效。

2、配制根系Assay Buffer工作液∶按萘胺標準(50ug/ml)∶根系Assay Buffer =1:1混合,即為根系Assay Buffer工作液,即配即用,不宜久置。

4、準備樣品和對照︰

①樣品管︰取0.2~0.5g植物須根系,洗凈,用濾紙吸干,完全浸沒于15ml根系AssayBuffer 工作液,室溫靜置5min,浸泡液即為待測樣品。注意∶植物根系活力與培養時間、酸堿、重金屬、高溫、低溫等條件均有關系,在缺陷培養、堿性、重金屬、高溫情況下,根系活力會有不同程度的下降。

②對照管︰加入4ml根系Assay Buffer 工作液(不加根),室溫靜置5min。③第一次取樣后,將兩管25℃避光孵育60min后第二次取樣。

5、加樣∶按照下表設置空白管、對照管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡;如果樣品中的根系活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置﹖平行管,求平均值。

6、測定∶
①將系列標準管室溫靜置20min,比色杯光徑1cm,以空白管調零,以分光光度計測定510nm處系列標準管(1~6號)吸光度;
②將對照管、測定管室溫靜置20min,,比色杯光徑1cm,以分光光度計測定510nm處對照管、測定管的吸光度(即為A對照o、A測定o);
③將第二次取樣的對照管、測定管室溫靜置20min,比色杯光徑1cm,再以分光光度計測定510nm 處對照管、測定管的吸光度(即為A對照1、A測定1)。

 

 

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