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RNA病毒直接qRT-PCR保存液

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RNA病毒直接qRT-PCR保存液( RNA Virus Direct qRT-PCR Preservation Solution)是一種中性、非滅活的病毒保存液,適用于活病毒保存。可用于血漿、血清、無(wú)細(xì)胞體液、拭子及細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品采集后的保存和運(yùn)輸,并且無(wú)須抽提RNA,可直接用于qRT-PCR,大大簡(jiǎn)化RNA病毒的核酸檢測(cè)步驟。

本保存液也稱為病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液(Viral Transport Medium, VTM),含有抗生素和FBS。其中抗生素具有廣譜抗菌作用,防止加入樣品后其它微生物的生長(zhǎng),F(xiàn)BS做為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,對(duì)病毒有一定的保護(hù)作用,可維持病毒的活性。 使用本保存液保存后的病毒未被滅活,可用于后續(xù)病毒的培養(yǎng)和分離。

除了常規(guī)的非滅活病毒保存液或病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液功能外,在使用合適的一步法qRT-PCR試劑盒情況下,本產(chǎn)品保存的病毒樣品也可以直接用做qRT-PCR的模板,大大簡(jiǎn)化RNA病毒的核酸檢測(cè)步驟。本產(chǎn)品用于新型冠狀病毒(2019-nCoV) N基因慢病毒(新冠假病毒)樣品的保存效果如下表所示。一定量新冠假病毒加入咽拭子中并保存在本保存液中,4℃保存72小時(shí),然后直接進(jìn)行qRT-PCR,與病毒樣品置于-80℃保存(對(duì)照組)的Ct值相比,Ct值基本一致。qRT-PCR試劑盒為,此處的病毒數(shù)為每個(gè)PCR反應(yīng)體系中病毒的IU (Infection Unit)數(shù)。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果會(huì)因試劑盒、實(shí)驗(yàn)條件、檢測(cè)儀器的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

  本保存液(4℃/72小時(shí)) 陽(yáng)性對(duì)照組(-80℃保存) 陰性對(duì)照組
病毒數(shù)(IU/PCR) 400 40 4 400 40 4 無(wú)菌水
Ct值 復(fù)孔1 24.95 29.26 32.31 24.71 28.55 31.88 Undetermined
復(fù)孔2 24.88 29.50 32.16 24.94 29.02 31.89 Undetermined
復(fù)孔3 24.89 29.36 32.25 24.89 28.89 31.89 Undetermined
平均值 24.91 29.37 32.24 24.84 28.82 31.89 -

本產(chǎn)品保存的病毒樣品也可以用于常規(guī)的RNA抽提方法進(jìn)行RNA抽提,如Trizol法和離心柱法等,特別適用于。使用時(shí)直接取100µl液體樣品,作為RNA提取的對(duì)象即可。

使用本保存液采集后的標(biāo)本應(yīng)盡快送檢,采集后應(yīng)盡可能在2-8℃、72小時(shí)內(nèi)完成轉(zhuǎn)運(yùn)。如需更長(zhǎng)時(shí)間的保存,可以放置于-80℃冰箱保存或使用保存樣品。

本產(chǎn)品100ml包裝可以用于約100-200個(gè)樣品的保存, 500ml包裝可以用于約500-1000個(gè)樣品的保存。

包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
R0145-100ml  RNA病毒直接qRT-PCR保存液 100ml
R0145-500ml  RNA病毒直接qRT-PCR保存液 500ml
說(shuō)明書(shū) 1份

保存條件:

4℃保存,一年有效。

注意事項(xiàng):

標(biāo)本采集人員需要按照相關(guān)要求做好防護(hù),后續(xù)操作應(yīng)在經(jīng)認(rèn)證的II級(jí)生物安全柜中進(jìn)行,遵循二級(jí)生物安全等級(jí)或更高標(biāo)準(zhǔn)。

如果保存的病毒樣品不經(jīng)RNA提取而直接用于qRT-PCR,。由于病毒樣品的多樣性和不確定性,建議通過(guò)與提取法進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)比較后再確認(rèn)是否可以用于直接qRT-PCR。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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