RNA病毒直接qRT-PCR保存液( RNA Virus Direct qRT-PCR Preservation Solution)是一種中性、非滅活的病毒保存液,適用于活病毒保存。可用于血漿、血清、無(wú)細(xì)胞體液、拭子及細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品采集后的保存和運(yùn)輸,并且無(wú)須抽提RNA,可直接用于qRT-PCR,大大簡(jiǎn)化RNA病毒的核酸檢測(cè)步驟。
本保存液也稱為病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液(Viral Transport Medium, VTM),含有抗生素和FBS。其中抗生素具有廣譜抗菌作用,防止加入樣品后其它微生物的生長(zhǎng),F(xiàn)BS做為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,對(duì)病毒有一定的保護(hù)作用,可維持病毒的活性。 使用本保存液保存后的病毒未被滅活,可用于后續(xù)病毒的培養(yǎng)和分離。
除了常規(guī)的非滅活病毒保存液或病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液功能外,在使用合適的一步法qRT-PCR試劑盒情況下,本產(chǎn)品保存的病毒樣品也可以直接用做qRT-PCR的模板,大大簡(jiǎn)化RNA病毒的核酸檢測(cè)步驟。本產(chǎn)品用于新型冠狀病毒(2019-nCoV) N基因慢病毒(新冠假病毒)樣品的保存效果如下表所示。一定量新冠假病毒加入咽拭子中并保存在本保存液中,4℃保存72小時(shí),然后直接進(jìn)行qRT-PCR,與病毒樣品置于-80℃保存(對(duì)照組)的Ct值相比,Ct值基本一致。qRT-PCR試劑盒為,此處的病毒數(shù)為每個(gè)PCR反應(yīng)體系中病毒的IU (Infection Unit)數(shù)。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果會(huì)因試劑盒、實(shí)驗(yàn)條件、檢測(cè)儀器的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本保存液(4℃/72小時(shí)) | 陽(yáng)性對(duì)照組(-80℃保存) | 陰性對(duì)照組 | ||||||
病毒數(shù)(IU/PCR) | 400 | 40 | 4 | 400 | 40 | 4 | 無(wú)菌水 | |
Ct值 | 復(fù)孔1 | 24.95 | 29.26 | 32.31 | 24.71 | 28.55 | 31.88 | Undetermined |
復(fù)孔2 | 24.88 | 29.50 | 32.16 | 24.94 | 29.02 | 31.89 | Undetermined | |
復(fù)孔3 | 24.89 | 29.36 | 32.25 | 24.89 | 28.89 | 31.89 | Undetermined | |
平均值 | 24.91 | 29.37 | 32.24 | 24.84 | 28.82 | 31.89 | - |
本產(chǎn)品保存的病毒樣品也可以用于常規(guī)的RNA抽提方法進(jìn)行RNA抽提,如Trizol法和離心柱法等,特別適用于。使用時(shí)直接取100µl液體樣品,作為RNA提取的對(duì)象即可。
使用本保存液采集后的標(biāo)本應(yīng)盡快送檢,采集后應(yīng)盡可能在2-8℃、72小時(shí)內(nèi)完成轉(zhuǎn)運(yùn)。如需更長(zhǎng)時(shí)間的保存,可以放置于-80℃冰箱保存或使用保存樣品。
本產(chǎn)品100ml包裝可以用于約100-200個(gè)樣品的保存, 500ml包裝可以用于約500-1000個(gè)樣品的保存。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
R0145-100ml | RNA病毒直接qRT-PCR保存液 | 100ml |
R0145-500ml | RNA病毒直接qRT-PCR保存液 | 500ml |
— | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件:
4℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
標(biāo)本采集人員需要按照相關(guān)要求做好防護(hù),后續(xù)操作應(yīng)在經(jīng)認(rèn)證的II級(jí)生物安全柜中進(jìn)行,遵循二級(jí)生物安全等級(jí)或更高標(biāo)準(zhǔn)。
如果保存的病毒樣品不經(jīng)RNA提取而直接用于qRT-PCR,。由于病毒樣品的多樣性和不確定性,建議通過(guò)與提取法進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)比較后再確認(rèn)是否可以用于直接qRT-PCR。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。