pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc是哺乳動物細胞表達質(zhì)粒，用于表達C端帶有Myc標簽(EQKLISEEDL)的新冠病毒(SARS-CoV-2)包膜(Envelop，E)蛋白，可以使用抗Myc標簽的抗體來識別E蛋白的表達，或進行免疫共沉淀分析等。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達，質(zhì)�？敲顾乜剐�。轉(zhuǎn)染細胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。
E蛋白是SARS-CoV-2冠狀病毒最小的結(jié)構(gòu)蛋白，僅由75個氨基酸殘基組成，主要分布于病毒包膜上。冠狀病毒E蛋白包含可以形成同源五聚體的α-螺旋跨膜結(jié)構(gòu)域(transmembrane domain)。該同源五聚體形成的離子通道(Ion channels)對離子的選擇性較差。E蛋白參與病毒的組裝和釋放并與病毒的致病性有關(guān)，它與M蛋白的相互作用對病毒出芽過程起重要作用。
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc質(zhì)粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| E protein | 677-901 |
| Myc-tag | 902-931 |
| Multiple cloning site | 935-1001 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1044-1065 |
| SV40 polyA signal | 1077-1460 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1598-1902 |
| bla promoter | 1927-2051 |
| SV40 promoter | 2071-2409 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2444-3235 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3236-3694 |
| pUC origin | 3823-4490 |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc質(zhì)粒(4542bp)的圖譜如下：
pcDNA3.1-SARS-CoV-2-E-Myc的多克隆位點的詳細圖譜見說明書：
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括：
| AclI | AflII | AhdI | AleI | AscI | AsiSI | BaeI |
| BbsI | BbvCI | BcgI | BlpI | BmgBI | Bpu10I | BsgI |
| BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI | BsrGI | BssHII | BstEII |
| BstXI | BstZ17I | EcoNI | Esp3I | FseI | NotI | NruI |
| PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SacII |
| SapI | SbfI | ScaI | SgrAI | SmaI | SrfI | SwaI |
| TspMI | XcmI | XmaI | XmnI |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括：
| AccI | GT`MK,AC | 966 | KasI | G`GCGC,C | 2571 |
| AfeI | AGC|GCT | 660 | MfeI | C`AATT,G | 1324 |
| AgeI | A`CCGG,T | 664 | MluI | A`CGCG,T | 1460 |
| ApaI | G,GGCC`C | 999 | MscI | TGG|CCA | 2654 |
| ApaLI | G`TGCA,C | 4176 | NarI | GG`CG,CC | 2572 |
| AvaI | C`YCGR,G | 977 | NdeI | CA`TA,TG | 240 |
| BamHI | G`GATC,C | 935 | NheI | G`CTAG,C | 597 |
| BclI | T`GATC,A | 1231 | PaeR7I | C`TCGA,G | 977 |
| BglII | A`GATC,T | 971 | PciI | A`CATG,T | 4490 |
| BmtI | G,CTAG`C | 601 | PflFI | GACN`N,NGTC | 2690 |
| BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 3561 | PluTI | G,GCGC`C | 2575 |
| BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 1624 | PspOMI | G`GGCC,C | 995 |
| BseRI | GAGGAG(N)8,NN` | 2390 | PstI | C,TGCA`G | 951 |
| BsoBI | C`YCGR,G | 977 | PvuI | CG,AT`CG | 1077 |
| BspDI | AT`CG,AT | 2412 | RsrII | CG`GWC,CG | 3088 |
| BsrDI | GCAATG,NN` | 2805 | SacI | G,AGCT`C | 655 |
| BstBI | TT`CG,AA | 3254 | SalI | G`TCGA,C | 965 |
| BtsI | GCAGTG,NN` | 1413 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2347 |
| ClaI | AT`CG,AT | 2412 | SfoI | GGC|GCC | 2573 |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | SnaBI | TAC|GTA | 346 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 1690 | SpeI | A`CTAG,T | 989 |
| EagI | C`GGCC,G | 2478 | StuI | AGG|CCT | 2393 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 653 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 2690 |
| EcoRV | GAT|ATC | 961 | XhoI | C`TCGA,G | 977 |
| HindIII | A`AGCT,T | 941 |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'
T7 primer(1044-1065): 5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC- 3'
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc的全序列信息: D2947 pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc序列.txt。
包裝清單：| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| D2947-1μg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 1μg |
| D2947-100μg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 100μg |
| — | 說明書 | 1份 |
-20℃保存。
注意事項：本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時，請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml�？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細胞。
