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白色念珠菌 PCR 試劑盒

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白色念珠菌 PCR 試劑盒(Canidia albicans)又叫白假絲酵母菌是一種真菌,通常存在于正常人口腔,上呼吸道,腸道及陰道,一般在正常機體中數量少,不引起疾病,當機體免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制約作用失調,則本菌大量繁殖并改變生長形式(芽生菌絲相)侵入細胞引起疾病。其中包括皮膚念珠菌病(好發于皮膚皺褶處,皮膚潮紅、潮濕、發亮,有時蓋上一層白色或呈破裂狀物,病變周圍有小水泡)、粘膜念珠菌病(以鵝口瘡、口角炎、陰道炎最多見)、內臟及中樞神經念珠菌病(可由粘膜皮膚等處病菌播散引起,有肺炎 腸胃炎、心內膜炎、腦膜炎、腦炎等,偶爾也可發生敗血癥)。因此快速靈敏檢測梭狀芽孢桿菌具有重要的意義,本試劑盒就是為此目的根據 PCR 原理開發, 它具有下列特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供細菌 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增白色念珠菌 DNA。

3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的PCR 50 次。

本產品只能用于科研。

 

編號

十孔盒包裝

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL(紅蓋

超純水

100935

1 mL(亮黃蓋

白色念珠菌 PCR 引物混合液

13-60210yw

100 μL白蓋

白色念珠菌 PCR 陽性對照

1×10E8 拷貝/μL

13-60210pc

50 μL黃蓋

天凈沙核酸釋放劑試用裝

61202

20 次(1mL、綠蓋)

使用手冊

13-60210sc

1 份

 

低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其

他試劑。

一、樣品 DNA 的制備

 

1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照,一個是 NC(樣品制備陰性對照。可以用 10μL 陽性對照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作 PC。另外用水作為 NC

2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數細菌 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的細菌 DNAout 或柱式細菌 DNAout。本試劑盒免費贈送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑,本產品的裂解液可以直接作為 PCR 模板,省略了 DNA 提取步驟。

 

二、設置 PCR 反應40 μL 體系

 

N+2 個樣品,在PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 PCR 管中分別加入下列成分

 

成分N+2 PCR PCR 陽性

樣品管對照對照

PCR MagicMix 3.0  20 μL     20 μL      20 μL白色念珠 PCR 混合        2 μL      2 μL      2 μL N+2 樣品 DNA 模板 18 μL        -          -

樣品制備陰性對照(超純水          -         18 μL        -

陽性對(白色       --        18 μL陽性對照 10000 稀釋液)

2. 按下表設置 PCR 反應:

三、電泳檢測

2.  10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix在擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR產物長度為 263bp。陽性對照必須有此條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR

擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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