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偽狂犬病病毒PCR試劑盒

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 偽狂犬病病毒PCR試劑盒(Pseudorabies VirusPrV)又稱豬皰疹病毒Ⅰ型、傳染性延髓麻痹病毒、奇癢癥病毒、奧葉茲基氏病病毒。是引起牛、羊、豬、犬和貓等多種家畜和野生動物發熱、奇癢(豬除外)及腦脊髓炎為主要癥狀的皰疹病毒。由于本病的臨床癥狀類似狂犬病,故也用“偽狂犬病”這一病名。偽狂犬病與狂犬病毒并沒有關系,而是屬于皰疹病毒。因此快速靈敏檢測偽狂犬病病毒具有重要意義。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的試劑盒,它具有下列特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增偽狂犬病病毒,與其他微生物沒有交叉反應。

3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

本試劑盒足夠做 40μL 體系的PCR 50 次,但只能用于科研。

 

編號

十孔盒包裝

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL(紅蓋

超純水

100935

1 mL(亮黃色

偽狂犬病病毒PCR

引物混合液

同 13-35100yw

100 μL白蓋

偽狂犬病病毒PCR 陽性對照

1×10E8 拷貝/μL

同 60908-35100pc

50 μL黃蓋

天凈沙核酸釋放劑(試用裝)

61202

20 (1 mL,綠蓋

使用手冊

同 13-35100sc

1 份

 

低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其

他試劑

 

樣品 DNA

一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送 20 次天凈沙核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網站天凈沙核酸釋放劑或產品編號 61202 下載。

2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量中加 10μL PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品

 

制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用

二、設置PCR 反應40μL 體系

3.  N+2 個樣品,在PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 PCR 管中分別加入下列成分:

成分N+2 PCR PCR 陽性

樣品管對照對照

PCR MagicMix 3.0 20 μL20 μL20 μL

偽狂 PCR  2 μL2 μL2 μL混合液

N+2 樣品 DNA 模板 18 μL--

PCR -18 μL-

PCR 陽性對照偽狂犬病

 PCR 性對照--18 μL 1000 

 

4. 按下表設置 PCR 反應:

 

、電泳檢測

 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix在擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR產物長度為 100bp。陽性對照必須有條帶出現,陰性對照必須無任何擴增, 否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

 

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