保存條件
收到TIANexact基因分型PCR試劑 (探針法)后, 請立即置于-20℃ 避光保存,在該條件下避光可保存2年。從-20℃ 取出使用時,將凍存的2×TIANexact Genotyping PreMix (Probe)和50×ROX Reference Dye
溶解,然后輕輕顛倒混勻,待溶液完全均一后再行使用。如解凍后沒有使用,須徹底混勻后重新冷凍(在解凍過程中鹽會出現(xiàn)分層現(xiàn)象,未混勻進行冷凍,鹽晶體的析出將會對酶造成損害)。如需一段時間內(nèi)經(jīng)常取用,可在2~8℃條件下儲存3個月。避免反復多次凍融。
產(chǎn)品簡介
TIANexact Genotyping qPCR PreMix(Probe)是一款專門應用于探針法SNP檢測的即用型2×濃度的熱啟動PCR預混試劑。該預混試劑含有特異的抗體修飾Taq DNA聚合酶,能有效檢測低豐度的DNA模板。精心配制的獨特PCR緩沖液能有效消除眾多PCR抑制劑對PCR的抑制及對熒光信號淬滅的影響,對SNP鑒定有很好的特異性和擴增效率。
試劑盒特點
1. 防彈式基因分型---輕松屏蔽PCR抑制劑對SNP分型的影響
2. 快速反應----對多數(shù)實驗能夠執(zhí)行快速PCR操作
3. 熒光信號強----強勁的SNP分型僅需少量的引物探針
4. 避免操作失誤----添加藍色指示染料,監(jiān)控實驗添加過程
試劑盒原理
1. TIANexact基因分型PCR試劑 (探針法)適用于水解探針法進行模板的熒光定量PCR和SNP檢測,該產(chǎn)品可以克服PCR反應液中的抑制因子,特別是對粗提樣本,其表現(xiàn)出高度的抗逆性。適用于植物,動物,以及一些環(huán)境樣本的粗提液。
2. 2×TIANexact Genotyping PreMix (Probe)中特異的抗體修飾熱啟動Taq DNA聚合酶,95℃條件下僅需2~5分鐘即可激活全部酶活,減少了反應時間,同時也充分的減少PCR擴增全程中的非特異性擴增,配合精心優(yōu)化的buffer體系,使該產(chǎn)品對于序列變異的鑒定有很好的特異性和擴增效率。
3. 2 × TIANexact Genotyping PreMix (Probe)包含dNTPs,增強劑,穩(wěn)定劑等以提高產(chǎn)物特異性和反應靈敏度,并包含一種微藍色的指示染料,該染料對PCR反應以及探針熒光沒有任何影響;使操作更加方便,避免大量樣本小體系(10 μl體系)操作過程中容易產(chǎn)生的加樣錯誤。
注意事項
1.如果試劑沒有混勻,其反應性能會有所下降。使用時請上下顛倒輕輕混勻,請不要使用振蕩器進行混勻,盡量避免出現(xiàn)泡沫,并經(jīng)瞬時離心后使用。
2.本產(chǎn)品中不含有熒光探針。
3.引物終濃度為0.3 μM,探針終濃度為0.2 μM可以在大多數(shù)體系中獲得良好的擴增結(jié)果。 需要進一步優(yōu)化引物濃度的,可以在0.1-0.9 μM范圍內(nèi)調(diào)整;需要進一步優(yōu)化探針濃度的,可以在0.1-0.25 nM范圍內(nèi)調(diào)整。
4.20 μl反應體系中,基因組DNA模板的使用量一般小于100 ng。