產品簡介:
目前酶免疫分析(EIA)技術,已被廣泛應用于抗原,半抗原或抗體的定量或定性檢測分析。辣根過氧化物酶(HRP)及其偶聯物是酶聯免疫分析技術中常用的一種酶,由于3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)在HRP的顯色反應體系中,比其它色原具有更高的靈敏度且無致癌性而被廣泛應用。TMB主要應用于酶聯免疫吸附實(ELISA),免疫斑點雜交或者免疫組化以及氯和過氧化氫的檢測分析。為了滿足不同的試劑盒產品研發與生產以及科研需求, 本公司專門研制了針對不同類型的基于HRP的免疫分析用TMB顯色液。
外觀與結構:顯色液 A 應為無色或淡黃色透明液體,顯色液 B 應為無色透明液體。均無沉淀、顆粒及絮狀物。用于酶聯免疫實驗中的顯色階段:可于樣本反應,生成深藍色產物。
使用方法:
加液:待樣品孔中加完HRP結合物并孵育一定時間后,用適當洗滌液洗板3-5次,每孔加底物顯色液A、顯色液B各50ul(A、B液先混合再加入孔中),輕輕混勻,根據個人實驗需要,在室溫(15-25℃)或37℃下避光溫育 10-30分鐘或更長時間,直至顯色至預期深淺。
終止:每孔加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應,孔中反應液由藍色變為黃色。讀數:終止反應后15分鐘內在450nm處測定各孔溶液的吸光值。
對照:空白對照不加HRP標記的抗體/抗原和陰性對照結果應無色。陽性對照及加HRP標記的抗體/抗原產生深藍色產物。
注意:如果出現高的反應背景或沉淀,表明TMB底物反應過于強烈。為了避免產生沉淀,可在終止后馬上讀數;或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物。
注意事項:
1、實驗用品應該專一,避免交叉污染。
2、TMB對人體有刺激性,請注意適當防護。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作