TdT末端轉移酶
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| 末端轉移酶（TdT）是一種不依賴于模板的DNA聚合酶，催化脫氧核苷酸結合到DNA分子的3’羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物，加尾長度可達5~300nt。該末端轉移酶（TdT）分子量為58.3 kDa，無5’和3’核酸外切酶活性，反應中加入Co2+可提高加尾效率。該酶廣泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修飾堿基（如ddNTP，DIGdUTP）標記DNA 3’末端、TdT介導的dUTP 缺口末端標記技術（細胞凋亡的原位檢測）等試驗。該酶經檢測無DNA內切酶和外切酶污染，不含RNase。 | ||||||||||||||
組分 | ||||||||||||||
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應用 | ||||||||||||||
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活性定義 | ||||||||||||||
| 37℃60分鐘內，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羥基末端中所需的酶量定義為1個活性單位 | ||||||||||||||
1×TdT Buffer | ||||||||||||||
| 100mM KCl, 30mM Tris-acera, 0.05% (v/v) Triton X-100 (pH 7.5 at 25 °C) | ||||||||||||||
儲存 | ||||||||||||||
| -20℃可保存3年。 | ||||||||||||||
熱失活 | ||||||||||||||
| 75°C 20min。 | ||||||||||||||
注意事項 | ||||||||||||||
| 1、適量EDTA可使Terminal Transferase的活性喪失。 2、金屬離子螯合劑，較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對Terminal Transferase活性具有抑制作用。 | ||||||||||||||
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