肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)
產(chǎn)品簡介：
肌酐(creatinine,Cr)是人體或動(dòng)物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐，由腎小球?yàn)V過排出體外，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物，內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。
雅吉生物肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)檢測(cè)原理是肌酐與苦味酸鹽發(fā)生Jaffe反應(yīng)，生成橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物，該復(fù)合物生成量與肌酐含量呈正比，通過酶標(biāo)儀測(cè)定510nm處吸光度，可用于檢測(cè)人體、動(dòng)物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
| 名稱 | 100T | Storage |
| 試劑(A):肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L) | 1ml | 4℃避光 |
| 試劑(B):肌酐標(biāo)準(zhǔn)稀釋液 | 10ml | RT |
| 試劑(C):蛋白沉淀液 | 5.5ml | RT避光 |
| 試劑(D):Cr顯色液 | 50ml | RT避光 |
| 試劑(E): Cr Assay Buffer | 5.5ml | RT |
自備材料：
1、1.5ml離心管、96孔板
2、離心機(jī)、酶標(biāo)儀
3、蒸餾水
操作步驟(僅供參考)：
1、準(zhǔn)備樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備，-20°℃凍存。取血清或血漿0.05ml，加入蛋白沉淀液0.45ml，充分混勻，靜置5min后3500r/min離心10min，取上清液，4°℃保存待用;尿液中肌酐含量較高，應(yīng)先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測(cè)。
2、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液:取肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L)，按肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L):肌酐標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:99的比例混合，使?jié)舛冗_(dá)到100μmol/L，即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液-肌酐標(biāo)準(zhǔn)(100μmol/L);4℃保存，1周有效。
3、Cr 加樣:按照下表設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
| 加入物（μl） | 空白孔 | 標(biāo)準(zhǔn)孔 | 測(cè)定孔 |
| 蒸餾水 | 150 | - | - |
| 肌酐標(biāo)準(zhǔn)(100μmol/L) | - | 150 | - |
| 血清無蛋白濾液或稀釋尿液 | - | - | 150 |
| Cr顯色液 | 50 | 50 | 50 |
| Cr Assay Buffer | 50 | 50 | 50 |
4、Cr檢測(cè):充分混勻，室溫放置15min，酶標(biāo)儀檢測(cè)510nm吸光度，空白孔調(diào)零，讀取各孔吸光度，分別為A標(biāo)準(zhǔn)、A測(cè)定。
計(jì)算:
血清(漿)肌(μmol/L)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×100
尿液肌酐(μmol/d)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×100×N×24h 尿量(L)
式中:
A測(cè)定=測(cè)定孔的吸光度
A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度N=尿液稀釋倍數(shù)
內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)校正的內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=內(nèi)生肌醉清除率值×1.73/體表面積(m2)
注:以正常人24h內(nèi)生肌酐清除率值為128L(即24h內(nèi)有128L血液中的肌酐通過腎臟被清除)作為100%，則內(nèi)生肌酐清除率(%)=校正的內(nèi)生肌酊清除率值×100/128(或0.78)
單位換算:d=24h
參考區(qū)間：
| 健康成年男性血清肌酐 | 44~133μmol/L(O.5~1.5mg/dl) |
| 健康成年女性血清肌酐 | 70~106μmol/L(O.8~1.2mg/dl) |
| 健康成年男性肌酐清除率值 | 105±20ml/min |
| 健康成年女性肌酐清除率值 | 95±20ml/min |
注意事項(xiàng):
1、測(cè)定各孔時(shí)，各孔溫度均需達(dá)到室溫，否則影響結(jié)果。
2、輕度溶血樣本對(duì)肌酐測(cè)定無影響;尿液樣品中肌酐含量較高，樣品需做50~200倍稀釋，如果顯色后吸光度仍較高，還需將尿液繼續(xù)擴(kuò)大稀釋倍數(shù)，重新檢測(cè)。
3、呈色后標(biāo)準(zhǔn)管吸光度較穩(wěn)定，但測(cè)定管吸光度隨時(shí)間延長而增加;另外肌酐濃度越高，吸光度變化越快，因此加入顯色劑后30min內(nèi)完成檢測(cè)為宜。
4、以標(biāo)準(zhǔn)品做梯度實(shí)驗(yàn)，200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色，超過200μmol/L顏色逐漸加深，呈橘紅色，到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標(biāo)儀測(cè)定100μmol/L，吸光度值在0.3左右。
有效期:12個(gè)月有效。
