神經元是通過電和化學信號處理和傳輸信息的可電刺激細胞。 化學信號通過突觸與其他細胞的專門連
接發生。 神經元相互連接形成網絡。 神經元是神經系統的核心組成部分， 包括大腦、 脊髓和周圍神經節。
小鼠神經干細胞 （NSC） 成神經元細胞誘導分化試劑盒， 包含神經干細胞成神經元誘導分化基 礎培養基和其他添加物組成。 該產品已經成功應用于小鼠神經干細胞向神經元的分化。
注意： 本產品僅提供給進一步科研使用， 不可用于臨床治療等其他用途。
| 試劑盒成分 | 貨號 | 體積 |
| Basal Medium For Cell Culture 細胞基礎培養基 | 03011 | 98 mL |
| Supplements For Mouse NSC Neurogenic Differentiation 小鼠神經干細胞成神經元誘導分化添加物 | 04081 | 2 mL |
質量控制
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通過細菌、 真菌、 支原體、 內毒素檢測。 通過滲透壓、 pH 檢測。 通過產品性能檢測。 |
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詳情見 《產品檢測報告》 。 |
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處理原則 |
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嚴格的無菌環境。 務必保證實驗室整體和操作區域的清潔。 規范的操作方式。 請按照產品說明書描述的方式操作， 嚴格控制變量， 做好對照實驗。 各成分需按照保存條件妥善存放， 并盡快使用。 若短期內無法用完整套培養基， 應按套裝內各成分體積比例分批配制并分裝保存。 |
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產品穩定性及保存條件 |
1. 套裝內所有成分均需避光保存。
2. 套裝內基礎培養基需置于 4℃冰箱保存， 保質期為 1 年； 其他成分需置于-20℃保存， 保質期為 2 年。
3. 配制后的完全培養基， 需放置 4℃保存， 保質期為 1 個月； 若能保證培養條件穩定， 容器密封性能良
好， 避免冷熱交替， 則保質期可適當延長， 但不得超過 45 天。
4. 所有產品請于保質期內使用； 過期的成分可能嚴重影響培養效果。
所需材料
小鼠神經干細胞成神經元細胞誘導分化培養基試劑盒
清潔、 無菌、 質量穩定的一次性耗材 （移液管、 移液器吸頭、 離心管等）
潔凈的封口膜、 鋁箔紙等避光材料
操作步驟
1. 配制前至少 30 min， 將套裝中 小鼠神經干細胞成神經元誘導分化添加物放置于室溫， 直至完
全融化。
2. 上下顛倒或輕彈試劑管以混勻試劑。
3. 用 75%醫用酒精仔細擦拭所有成分外包裝。 在超凈臺內打開包裝。
4. 將 小鼠神經干細胞成神經元誘導分化添加物全部加入 細胞基礎培養基中。
5. 擰緊基礎培養基瓶蓋， 輕柔并充分搖勻。
注意： 若短期內無法用完全部培養基， 我們建議分批配制； 請按照套裝內各成分比例， 配制所需量； 但剩余的成分必須嚴格按照各自的保存條件妥善保存， 并且不可多次凍融。
6. 用封口膜密封瓶口， 用鋁箔紙包裹瓶身， 并標注名稱、 配制日期等信息。
注意： 小鼠神經干細胞成神經元細胞誘導分化試劑盒內的所有成分都嚴格控制無菌， 一般情況 下我們不建議再次除菌。 若配制過程有污染風險， 可將完全培養基過濾除菌。
誘導分化操作規程
所需材料
小鼠神經干細胞成神經元細胞誘導分化試劑盒
Phosphate-BufferedSaline (1×PBS)
Poly-L-lysine （PLL）
Laminin
無菌超純水
操作步驟
培養器皿表面 Poly- L-lysine （PLL） /Laminin 鋪板
1. 細胞分化實驗前至少一天， 進行 PLL/Laminin 鋪板準備。
2. 使用無菌超純水稀釋 PLL 至終濃度為 15 μg/mL 備用。
3. 向培養板中加入適量步驟 2 中的 PLL 溶液， 搖勻至均勻覆蓋底面。
4. 室溫放置 30 min。
5. 吸去 PLL 溶液， 使用適量的無菌水清洗一次。
6. 用無菌超純水稀釋 Laminin 至終濃度為 15 μg/mL 備用。
7. 向培養板中加入步驟 6 中的 Laminin 溶液， 搖勻至均勻覆蓋底面， 封口膜封口后放置 4℃過夜備用。
注意： 包被后的培養板， 在無菌和 Laminin 不蒸干的條件下， 可以在 4℃存放一周， 請于一周內使
用。
8. 使用前將 Laminin 吸去， 并用 PBS 清洗一次， 晾干后備用。
小鼠神經干細胞的培養操作規程
1. 將完全培養基預熱至 37℃。
2. 準備 15 mL 或其他型號離心管， 收集培養容器中的培養基。
3. 用小鼠神經干基礎培養基 （若有） 洗滌細胞 1 次， 注意動作輕柔， 清洗全面， 收集基礎培養基。
4. 收集的所有細胞懸液以 160×g 離心 5 min。
5. 離心后去除上清。 加入 1 mL 完全培養基， 輕柔吹打細胞沉淀約 15~20 次， 充分吹散、 混勻。
注意： 吹打動作不可劇烈， 避免產生大量氣泡， 否則可能損傷和損失細胞。
6. 將細胞按(2.5~4) ×104 個活細胞/cm2 接種至適宜的培養容器內。
7. 搖勻細胞， 放入 37℃、 5%CO2、 飽和濕度的 CO2 培養箱中。
8. 傳代次日， 觀察細胞狀態, 可適量添加新鮮培養基。
注意： 若傳代后發現較多細胞死亡， 則應進行換液操作 （詳見傳代步驟 2~4， 離心后去除上清， 用 1 mL 完全培養基輕輕吹散沉淀幾次后接種即可， 請勿重復吹打）
神經元細胞誘導分化操作規程
1. 將神經干細胞按 2 x104 個細胞/cm2 鋪至經過 PLL/Laminin 包被的六孔板中。
2. 搖勻細胞， 放入 37℃、 5%CO2、 飽和濕度的 CO2 培養箱中。
3. 2 天后， 更換 小鼠神經干細胞成神經元細胞誘導分化培養基。
4. 之后， 每 3 天更換一次新鮮誘導分化培養基。
5. 在第 7 天進行相關分析或提取 RNA 或蛋白進行后續實驗。
