H1細胞完全培養基
(包含貨號:001和001a)
H1細胞基礎培養基 貨號:001
規格:500mL 儲存條件:基礎培養基2 ~ 8℃,
H1細胞培養添加劑 貨號:001a
規格:20ml
儲存條件:添加劑-80 ~ -20℃;混勻后2 ~ 8℃,2周內使用完畢。
產品簡介
H1細胞培養基是我們開發出的一種適用于無飼養層培養、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人多潛能干細胞(hESC/hiPSC)完全培養基。H1細胞培養基是在James Thomson實驗室開發的Essential 8培養基的基礎上,由我公司改良研發出的最新型多潛能干細胞完全培養基。hESC/hiPSC在H1細胞培養基中可以快速增殖,而分化的細胞則無法在該培養基中生長,從而選擇性擴增并獲得高純度多潛能干細胞。
產品內容:
產品貨號 | 名稱 | 規格 | 數量 |
001 | H1細胞基礎培養基 | 500mL | 1瓶 |
001a | H 1細胞培養添加劑 | 20mL | 1支 |
試劑準備:
H1細胞完全培養基:將復溶的H1細胞添加劑加入H1細胞基礎培養基中形成H1細胞完全培養基(推薦20mL添加劑,每2mL添加劑與50mL基礎培養基混合)。
H1細胞完全培養基可在2-8℃穩定儲存2-3周。
疑難解答:
•是否還需要往H1細胞完全培養基中補充或添加成分?
不需要。H1細胞培養基中各個成分的質量和濃度都經過了最優化實驗,完全支持人ESC/iPSC的長期培養,您無需再自行添加。
•培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題?
添加劑在解凍過程中,若有少量沉淀析出,屬于正常現象,不影響使用,請充分混勻后與基礎培養基混合。但添加劑不能在37℃解凍,否則會析出大量沉淀,影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀,請不要使用。
•是否能在37 ℃反復水浴H1細胞完全培養基?
不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉換會導致H1細胞完全培養基中含有的因子失活,H1細胞完全培養基在使用前平衡至室溫即可。
• H1細胞在傳代后不貼壁怎么解決?
造成H1傳代后不貼壁的最可能的原因:
① 細胞消化時間不合適;②消化后吹打次數不合適,使得完成傳代后細胞集落過大或過小。
• H1分化怎么處理?
① 細胞在剛復蘇或傳代時,小的細胞團不呈現標準的克隆形態,培養幾天或傳代后可恢復。②如果H1分化的表現為干細胞克隆形態良好,克隆周邊出現散在的分化細胞,可通過高比例傳代(≥1:10),使得分化細胞的密度減少,低密度的分化細胞可被H1培養體系篩選去除,如未完全去除,可用細胞刮或巴斯德管刮除。
② 如果H1分化的表現為克隆內部松散,邊緣不平滑,在分化比例小或分化不嚴重的情況下,可通過連續傳代2 ~ 3次恢復,如果分化嚴重,建議棄除。
• 細胞復蘇率低是什么原因?
細胞復蘇需使用H1細胞復蘇培養基,可大大提高細胞的復蘇效率。復蘇過程中,轉移細胞、吹打混勻和重懸細胞時,吹打力度要輕柔,并盡量減少吹打次數,細胞接種后,即刻在顯微鏡下觀察細胞團塊的大小,4 ~ 10個細胞的團塊為最佳。如果吹打力度過大或次數過多,
導致細胞分散成單細胞,細胞復蘇率將偏低。