產品簡介：
CellTiter-Lumi Steady發光法細胞活力檢測試劑盒(CellTiter-Lumi Steady Luminescent Cell Viability Assay Kit)，簡稱CTL Steady發光法細胞活力檢測試劑盒或CTL Steady，是一種通過化學發光法測定細胞內ATP含量從而用于超高信號穩定性、超高靈敏度、超寬線性范圍定量檢測活細胞數目的試劑盒。本產品和同類產品相比，最大的特點是發光信號特別穩定，1小時內信號整體上下波動范圍通常不超過±10%，特別適用于待測樣品數量較多、耗時較長且須前后數據進行比較的多孔板中細胞活力的大批量連續測定，也特別適用于高通量篩選(high-throughput screening)的自動化操作系統。
使用說明：
1. 細胞的準備：使用適合進行化學發光檢測的96孔板，每孔接種100μl細胞(如使用384孔板，每孔接種25μl細胞，具體用量視不同類型的 384孔板而定)，并確保檢測時每孔的細胞數量在3萬個以內(如使用384孔板宜控制在6千個以內)，同時設置不含細胞的培養液孔作為陰性對照，按照細胞培養的常規方法培養細胞。如有需要，可加入藥物處理細胞。此外，如有必要，也可以設置細胞的濃度梯度，以便后續確定試劑盒的使用效果。
2. ATP標準曲線的設置(選做)：把自備的ATP標準溶液用PBS或細胞培養液稀釋成適當的濃度梯度。初次檢測可以設置0、3、10、30、100、300、1000、3000nM這幾個濃度，96孔板每孔加入100μl的標準品。如有必要，在后續的實驗中可以根據細胞中的ATP含量對標準品的濃度范圍進行適當調整。如果用細胞培養液來稀釋ATP標準品，稀釋后需立即進行后續的發光檢測，否則培養液中的ATPase等可以消耗ATP的酶會導致ATP含量下降。
3. 檢測試劑的準備：
a. 融解凍存的CellTiter-Lumi Steady發光法檢測試劑，如有必要可適當分裝該試劑。經測試反復凍融5次對其檢測效果無顯著影響。
b. 按照96孔板每孔100μl (384孔板每孔25μl)的量，取適量CellTiter-LumiSteady發光法檢測試劑，平衡至室溫。
4. 細胞活力檢測：
a. 取出細胞培養板在室溫平衡10分鐘(通常不宜超過30分鐘)。
b. 96孔板每孔加入100μl CellTiter-LumiSteady發光法檢測試劑(384孔板每孔25微升)。
c. 室溫振蕩2分鐘，以促進細胞的裂解。
d. 室溫(約25ºC)孵育10分鐘，使發光信號趨于穩定。
e. 使用具有檢測化學發光功能的多功能酶標儀進行化學發光檢測。請根據儀器要求設置相應的參數，每個孔的檢測時間一般為0.25-1秒或更長時間，具體需根據儀器的檢測靈敏度進行適當的調整。
根據化學發光讀數直接計算細胞的相對活力，或根據ATP標準曲線計算出ATP的量從而計算出細胞的相對活力。
根據化學發光讀數直接計算細胞的相對活力，或根據ATP標準曲線計算出ATP的量從而計算出細胞的相對活力。
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