Lambda 核酸外切酶 (Lambda Exonuclease)
Cat.No.: YS-10087
Size:1000U Store at:-20℃
描述: Lambda 核酸外切酶作用于雙鏈 DNA,沿 5´→3´
方向逐步切去 5´單核苷酸。最適底物是 5´磷酸化的雙鏈
DNA,也能緩慢降解單鏈 DNA 和非磷酸化底物。該酶不能
從 DNA 的切刻或缺口處起始消化。
組分
名稱
1000U
5KU
Lambda Exonuclease (5 U/μl)
200 μl
1 ml
10×Lambda Exo Buffer
1 ml
1 ml×5
儲(chǔ)存:-20℃可保存 3 年。
活性定義:1 單位指在 50 μl 反應(yīng)體系中,37℃條件下,30
分鐘內(nèi)能從雙鏈 DNA 底物上催化產(chǎn)生 10 nmol 酸溶性脫氧
核糖核苷酸所需的酶量。
使用注意事項(xiàng)
(1)1×Lambda Exo Buffer:67 mM Glycine-KOH(pH 9.4
@ 25℃),2.5 mM MgCl2,50 μg/ml BSA,37℃溫育。
(
2)該酶的最佳反應(yīng)溫度為 37°C,75°C 10min 可失活。
(
3)5´
-0H 端的切割速度比 5´
-PO4端慢 20 倍,單鏈 DNA 比
雙鏈 DNA 慢 100 倍。
操作方法:
1.配置反應(yīng)體系如下:
DNA 2~5 μg
10×Lambda Exo Buffer 5 μl
Lambda Exonuclease 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37℃反應(yīng) 30min 。
3. 75℃ 10min 進(jìn)行熱失活。
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