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豬肝星狀細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述


肝星狀細(xì)胞是細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源,正常情況下肝星狀細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)。當(dāng)肝臟受到炎癥或機(jī)械刺激等損傷時,肝星狀細(xì)胞被激活,其表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停涡菭罴?xì)胞激活并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細(xì)胞。激活的肝星狀細(xì)胞一方面通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成和肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,另一方面通過細(xì)胞收縮使肝竇內(nèi)壓升高。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項:  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常肝組織。

2) 細(xì)胞鑒定:結(jié)蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長方式:梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
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