| 細胞周期（cell cycle）是指連續(xù)分裂細胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個過程。在這個過程中，細胞遺傳物質(zhì)復(fù)制并加倍，且在分裂結(jié)束時平均分配到兩個子細胞中去。細胞周期又可以分為間期(interphase)和有絲分裂期(M phase)，細胞間期又常劃分為休眠期（G0）,DNA合成前期(G1)，DNA合成期(S)，DNA合成后期(G2)，整個周期可表示為G1→S→G2→M。DNA周期檢測可用來反應(yīng)細胞周期的各個期的狀況，即細胞增殖狀況。利用細胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料(如碘化丙啶--PI)結(jié)合的特性，細胞各個時期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣(如下圖所示)。PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長為535 nm，最大發(fā)射波長為615 nm，PI的紅色熒光在 FL2或 FL3 通道檢測。每個樣采集 20000～30000events。本試劑盒經(jīng)過優(yōu)化的配方，可獲得絕佳的周期結(jié)果，可應(yīng)用于培養(yǎng)細胞（懸浮、貼壁）的 DNA含量（細胞周期）檢測。 | ||||||||
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組分 | ||||||||
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應(yīng)用 | ||||||||
| 細胞周期檢測 | ||||||||
儲存 | ||||||||
| 2～8℃，有效期1年。 | ||||||||
注意事項 | ||||||||
| 1. 乙醇固定后，細胞的吹打要輕柔，否則會導(dǎo)致細胞大量破碎。 2. 離心過程中盡可能采用吸取上清的方式，防止細胞大量丟失。 3. 無水乙醇要事先凍存于-20℃。 4. 試驗操作過程中佩戴手套等防護用品。 | ||||||||
實例 | ||||||||
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| 圖：將融合度90%的A549細胞細胞分兩組，一組作為對照組正常培養(yǎng)，另一組向培養(yǎng)基中加入終濃度為5mM的喜樹堿處理24h后收集細胞，用細胞周期檢測試劑盒（）處理后上流式細胞儀檢測，ModFit軟件分析，結(jié)果如圖。結(jié)果表明：實驗組經(jīng)過喜樹堿處理后S期明顯高于對照組，說明喜樹堿處理后明顯抑制了A549細胞的增殖，數(shù)據(jù)CV值RCS值很小，試劑盒檢測效果良好。 | ||||||||
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