胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。該消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的解離。本制品具有方便快速的特點,通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。 | ||
儲存 | ||
長期保存放置于-20℃,保存2年,一經(jīng)融化后放置于4℃保存,可放置6個月,避免反復凍融。 | ||
操作方法 | ||
1. 貼壁細胞的消化: a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。 b) 加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。 c) 顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。 d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。 e) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。 2. 組織的消化: 不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。?注意事項?1.在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。 2. 胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 |
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