15min高產全血基因組DNA提取試劑盒采用獨特的裂解液,可在15min內快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的DNA,最大限度的去除蛋白、色素、脂類等雜質污染。應用本試劑盒獲取的DNA純度高,無抑制劑,A260/A280為1.6-1.9。應用本試劑盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反應、PCR、文庫構建、Southern雜交等多種分子生物學實驗。 | ||||||||||||||||
組分 | ||||||||||||||||
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注意事項 | ||||||||||||||||
(1) 本試劑盒中的Washing Buffer中已經加乙醇,無需單獨添加。 (2)gDNA LB1,儲存時可能會有白色結晶沉淀,放置于56℃水浴鍋溶解后,不影響使用效果。 (3)蛋白酶K(20 mg/ml)長期保存請儲存于-20℃,短期室溫保存(6個月),其它組分儲存于室溫。 | ||||||||||||||||
儲存 | ||||||||||||||||
室溫避光保存,可儲存兩年。 | ||||||||||||||||
實例 | ||||||||||||||||
圖:應用高產全血基因組DNA提取試劑盒(H)、A公司、T公司和Q公司的血液提取試劑盒分別按其說明書提取人外周血樣品的DNA,提取的血液量分別為250μl和500μl。 | ||||||||||||||||
使用方法 | ||||||||||||||||
(1)樣本處理(1.5 ml EP管中處理) 抗凝全血:吸取200~500 μl抗凝全血加入到800 ul紅細胞裂解液中上下顛倒混合均勻,13000rpm離心30s,去上清,留細胞沉淀,用50μl水重懸細胞沉淀。 淋巴細胞分離液分離出的白細胞:直接吸取50μl白細胞。 有核紅細胞抗凝全血(禽血):吸取5 μl抗凝全血加入到50 μl無菌水中,漩渦震蕩混合均勻。 (2)向上述準備好的樣品溶液中加入100 μl gDNA LB1和20 μl蛋白酶K漩渦混合均勻10s,56℃水浴鍋中消化5min。 (3)加入700 μl gDNA BB2漩渦震蕩混合均勻1min,13000rpm離心3min。 (4)將上清液倒入到吸附柱中,13000rpm離心1min。 (5)倒掉廢液。向吸附柱中加入500 μl Washing Buffer,13000rpm離心15s。重復此步驟一次。 (6)將吸附柱重新放回離心機,13000rpm空離心2min,將殘留的乙醇徹底甩干。 (7)將吸附柱芯放入到1.5ml收集管中,向吸附柱芯中加入60~150 μl DNA Elution Buffer(DNA Elution Buffer預熱到65℃將提高洗脫產量),室溫放置1min,13,000rpm離心1min,洗脫液即為基因組DNA,冷凍保存。 |
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