SD DNA聚合酶是一種新型的Taq DNA聚合酶，該酶具有Bst聚合酶的強(qiáng)烈的鏈置換活性和Taq DNA聚合酶 的耐熱性能和聚合酶活性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高溫，且具有5'-3'聚合酶活性，5'-3'鏈置換活性 ，無(wú)外切酶活性，擴(kuò)增速度4kb/min,最佳反應(yīng)溫度為68℃，這些特征使得該酶廣泛適用于熱變性PCDR（ Polymerase Chain Displacement Reaction）、LAMP反應(yīng)、長(zhǎng)片段擴(kuò)增、富含GC片段擴(kuò)增，還可用于全 基因組測(cè)序（WGA）、單細(xì)胞測(cè)序和NGS建庫(kù)等領(lǐng)域。
SD DN 聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的組合下可進(jìn)行TaqMan探針的切割，用于qPCDR的擴(kuò)增。這種qPCDR 的新型方案將槽式PCR的高靈敏特性放置于單管、一步擴(kuò)增完成，這種檢測(cè)策略比qPCR靈敏度高10-100 倍，并且用時(shí)更短。
SD DNA 聚合酶采用了HaiGene的電子重構(gòu)架技術(shù)，提高了該酶對(duì)乙醇、胍鹽 、肝素、血清、植物多糖 多酚的耐受性。熱啟動(dòng)SD DNA聚合酶采用化學(xué)修飾，確保在50℃以下100%無(wú)活性，僅有90℃加熱5min以 后才能恢復(fù)酶活性，因此以降低低溫 狀態(tài)下的非特異性擴(kuò)增。
主要特征
- 同時(shí)具有強(qiáng)烈的鏈置換活性和聚合酶活性
- 可耐受90℃高溫
- 經(jīng)重構(gòu)架之后，具有耐受雜質(zhì)的特性
- 擴(kuò)增速度4kb/min,可很好的擴(kuò)增長(zhǎng)片段和復(fù)雜模板
單位定義
一個(gè)活力單位即在68°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
應(yīng)用
- 等溫?cái)U(kuò)增：LAMP，熱變性LAMP，tHDA和RCA
- PCDR
- PCR和定量PCR
- 全基因組測(cè)序、單細(xì)胞測(cè)序、NGS文庫(kù)構(gòu)建
儲(chǔ)存
-20°C可保存2年。
反應(yīng)實(shí)例
Fig .以不同數(shù)量級(jí)的P72質(zhì)粒為模板進(jìn)行PCR和PCDR擴(kuò)增，引物分別為Inner Primer，Out Primer，Inner+Out Primer, 產(chǎn)物1為Out Primer F/R(248bp)，產(chǎn)物2為Inner Primer F/Out Primer R(200 bp),產(chǎn)物3為OuT Primer F/Inner Primer R(164 bp),產(chǎn)物4為Inner Primer F/Inner Primer R(111 bp),1-5分別為10e5/10e4/10e3/10e2/10的P72質(zhì)粒，Marker為 DNA Marker 10,000。說(shuō)明：應(yīng)用SD DNA 聚合酶采用四引物的PCDR的靈敏度為標(biāo)準(zhǔn)PCR 的10倍左右。
