| Golden MLV反轉錄酶是海基在鼠源病毒反轉錄酶基礎上進行改良而得的第四代反轉錄酶，通過定點突變去除了RNase H活性，從而避免反轉錄過程中降解RNA。同時經過突變文庫篩選，使得其熱穩(wěn)定性更強，可耐受55℃高溫反應。相比于傳統(tǒng)42℃條件下反轉錄反應，采用55℃反轉錄可更好地打開RNA二級結構，從而提高復雜RNA模板的擴增性能、提高反轉錄cDNA的長度和產量，因此能更好地提高后續(xù)檢測的靈敏度。 |  | |||||
組分 | ||||||
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單位定義 | ||||||
| 以poly(rA)為模板、oligo(dT)為引物，在37°C條件下，10分鐘內催化1 nmol的dTTP摻入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定義為一個活性單位。 | ||||||
儲存 | ||||||
| -20°C可保存2年。 | ||||||
反應實例 | ||||||
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| Fig . 應用Golden MLV Reverse Transcriptase和T公司MLV 反轉錄酶反轉錄雞肌肉組織和人心臟組織總RNA獲得cDNA，然后分別擴增500bp、1642bp和1926bp(79%GC含量)的PCR產物。M:DNA Marker 2000 (HaiGene, A0701)，泳道1、2、3分別為T公司MLV反轉錄酶42°C、Golden MLV反轉錄酶42°C和Golden MLV反轉錄酶55°C。 | ||||||
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