| 9N 2.0 DNA連接酶（又名9oN DNA Ligase）能夠催化磷酸二酯鍵的形成，使與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5´-磷酸末端和3´-羥基末端通過磷酸二酯鍵相連。該酶來源于極度耐熱的海底超嗜熱古菌（Thermococcus sp.）9°N 菌株中克隆的連接酶基因，在 45℃-90℃ 范圍內均有活性。該酶進一步經基因工程基因突變，使得耐受更高的溫度，在90℃孵育15min仍然保留50%以上的活性，因此其適用于：（1）高溫條件下，連接DNA鏈上的切刻位點；（2）與 PCR 反應條件兼容可用連接酶檢測反應；（2）連接酶鏈式反應，對等位基因進行特異性檢測。 | ||||||
組分 | ||||||
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應用 | ||||||
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活性定義 | ||||||
| 1 單位指 50μl 反應體系中，45℃ 條件下，15 分鐘內能使 50% 的1μg 經 BstEII 消化的 λDNA 片段（12 bp 粘性末端）發生連接所需要的酶量。 | ||||||
儲存 | ||||||
| -20℃可保存兩年，長期儲存請置于-70℃。 | ||||||
1× 9N DNA Ligase 反應緩沖液 | ||||||
| 10 mM Tris-HCl，600μM ATP，2.5 mM MgCl2，2.5 mM DTT，0.1% Triton X-100（pH 7.5 @ 25℃），45℃ 溫育。 |
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