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RTS DH5a感受態(tài)細胞

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RTS(Room Temperature Stable)系列感受態(tài)細胞為HaiGene獨有的化學感受態(tài)專利技術制備,其室溫可保存3天、-20°C可保存2年(推薦保存溫度)、-80°C可長期保存性能無下降。運輸過程中無需干冰,可常規(guī)冰袋運輸(推薦運輸溫度)。RTS克隆感受態(tài)細胞均為熱激感受態(tài)細胞,專用于TA/平端/酶切連接的載體構建(不可用于無縫克隆載體構建),經(jīng)42°C熱激1min可獲得106~108cfu/μg效價, 該系列感受態(tài)細胞使用簡單、運輸、儲存方便。

組分

組分名稱 數(shù)量
RTS DH5α克隆感受態(tài)(10T) 2瓶
Nano E.coli Transfection Reagent 1 ml

應用

質粒轉化、DNA克隆、DNA測序

儲存

RTS系列感受態(tài)為干粉形式,均可室溫保存3天,長期保存-20°C(2年)。經(jīng)Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受態(tài)必須分裝后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受態(tài)細胞避免反復凍融,在-60°C以下可保存6個月。

操作方法

1.從-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent徹底融化,放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支凍干感受態(tài)細胞中,并分裝到10支1.5 ml EP管中(每支30 μl),于-60°C以下保存(或立即使用)。
2. 將5 μl連接產(chǎn)物加入到分裝的感受態(tài)細胞中,輕彈EP管(或槍頭輕輕吹打),置于冰上15min。
3. 置于42°C熱激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
4. 熱激完畢后,向上述感受態(tài)細胞中加入450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培養(yǎng)基,37°C振蕩(225 rpm)培養(yǎng)60min。使質粒上抗性標記基因表達,菌體復蘇。
5. 取200 μl復蘇菌液涂布到含相應抗生素的LB瓊脂平板表面。
6. 將平板置于37°C培養(yǎng),12~18小時后可出現(xiàn)菌落。
 
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