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脂多糖(LPS)提取試劑盒

規格
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 產品概述 product description

脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分,結構很復雜、熱穩定性極高(在250℃下干熱滅菌2h才完全滅活)。受LPS發現的歷史原因,如今LPS的概念幾乎等同于內毒素(endotoxin)。LPS由多糖鏈和脂質A組成,不同細菌間的多糖鏈是高度變化的,決定細菌的血清型;而脂質A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動,包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。 由于LPS與機體免疫機能的密切關系,生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究,如闡明LPS的結構,代謝,免疫學,生理學,毒性,生物合成途徑;誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌;誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應,急性肺損傷。 PS提取試劑盒采用簡單步驟即可快速提取細菌脂多糖,提取產量高,省時,蛋白質和核酸污染低。

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
細菌
產品特點
1.適用性廣,能從所有革蘭氏陰性菌中提取LPS。
2.操作簡單方便。
3.提取LPS下游應用廣,包括直接用于免疫刺激
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
1.離心機轉速有相對離心力(RCF,×g)和每分鐘轉速(RPM)兩種表示方式,有些離心機設置有RPM和×g顯示切換,但部分離心機沒有自動切換功能。需要用下面的公式進行換算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 為有效離心半徑,即從離心機軸心到離心收集管底部中心位置的長度,單位為厘米) 例如: 轉速為3000rpm,有效離心半徑為10 cm,則相對離心力(RCF,×g)為=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
2.可以用試劑盒或者苯酚硫酸法進行脂多糖定量。
 
使用方法

1. 室溫8000×g離心3分鐘收獲細菌細胞
2. 加入500 μl試劑A重懸細菌,8000×g離心3分鐘,棄上清。
3. 收集沉淀,加入500 μl試劑A重懸沉淀,8000×g離心3分鐘,棄上清。
4. 收集沉淀,加入500 μl提取液B重懸沉淀。
5. 在150-300w超聲10秒間隔10秒,超聲5-15分鐘。
6. 在10000×g離心10分鐘取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C,劇烈渦旋20秒充分混勻。
8. 在66-68℃水浴或氣浴孵育30分鐘。中間隔10分鐘用移液器輕輕吹打混勻。
9. 置4℃靜置過夜。
10. 在4℃,3000×g離心20分鐘。
11. 取最上層上清至另一干凈離心管,即得脂多糖樣品。
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