1.產品名稱：大鼠海綿體平滑肌細胞
2.組織來源：海綿體組織
3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是最硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系，破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
5.方法簡介：
大鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。
6.質量檢測：
大鼠海綿體平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息：
| 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
| 產品貨號 | CM-R203 |
| 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
| 生長特性 | 貼壁 |
| 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
| 傳代特性 | 可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
大鼠海綿體平滑肌細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
三、使用方法 大鼠海綿體平滑肌細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，標準操作流程下，細胞可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗 。 客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度 的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化 1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養 瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變 圓后，再加入5ml完全培養基終止消化； 3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5 mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養； 4)待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗 因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培 養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因 沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml ），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳 盡告知細 胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
