產(chǎn)品簡介：
采用特異性結(jié)合病毒 RNA 的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)，病毒RNA 提取試劑盒適合于從無細(xì)胞體液，包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒 RNA。該產(chǎn)品可以滿足絕大多數(shù)的病毒 RNA 的提取要求， 如病毒 RNA：HCV（丙肝病毒）,HIV（艾滋病毒）,和 HTLV（人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒）；等等。病毒裂解后，RNA 后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒 RNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的病毒核酸
無雜質(zhì)和 PCR 抑制劑，可直接適用于 PCR/RT-PCR 等分析。
它具有下列特點(diǎn)：
1. 不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 節(jié)省時間，簡捷，單個樣品操作一般可在 20 分鐘內(nèi)完成。
3. 多次柱漂洗確保高純度，提取的病毒 RNA 純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，可
適用于各種常規(guī)操作，包括 PCR/RT-PCR 等。
使用步驟：
第一次使用前請先在漂洗液 RW 瓶加入指定量無水乙醇!
1.200μl 血清等體液（需回復(fù)到室溫，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS 補(bǔ)足）轉(zhuǎn)入上述1.5ml 離心管，加入 400μl 裂解液 RLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。
2.室溫(15-25℃)放置 10 分鐘，每隔 5 分鐘，振蕩混勻一次。
3.加入 450μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。如果周圍環(huán)境高于 25℃,乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入。
4.將上述混合物加入一個吸附柱 RA 中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm 離心 30-60秒，倒掉收集管中的廢液。如果總體積超過 750μl，可分兩次將溶液加入同一個吸附柱 RA 中。
5. 加 500μl 去蛋白液 RE，12,000rpm 離心 30 秒，棄廢液。
6. 加入 500μl 漂洗液 RW（請先檢查是否已加入無水乙醇!），12,000rpm 離心 30 秒，棄廢液，加入 500μl 漂洗液 RW，重復(fù)一遍。
7. 將吸附柱 RA 放回空收集管中，13,000rpm 離心 2 分鐘，盡量除去漂洗液， 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
8. 取出吸附柱 RA，放入一個 RNase free 的離心管中，在吸附膜的中間部位加 30-50μl RNase free H20（事先在 65－70℃水浴中加熱效果更好）， 室溫放置 1 分鐘，
12,000rpm 離心 1 分鐘。如果想得到較多量的 RNA，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，12,000rpm 離心 1 分鐘。洗脫體積越大，洗脫效率越高。如果需要 RNA 濃度較高，可以適當(dāng)減少洗脫體積，但是最小體積不應(yīng)少于 20μl，體積過小降低洗脫效率，減少 RNA 產(chǎn)量。
9. RNA 病毒建議最好立刻使用，否則立刻短期放置在-70℃?zhèn)溆谩?/span>
注意事項(xiàng)：
提取液體樣品/病毒核酸(RNA 或 DNA)為何很難？
A：原因一是量少。病毒顆粒中的 RNA 或 DNA 是作為遺傳物質(zhì)保存，每個病毒最多只攜帶幾個拷貝(而一個細(xì)胞中有上萬種 RNA 分子，每種RNA 有很多拷貝)，同時其長度也十分有限(一般不到細(xì)胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很多，使得樣品中病毒核酸的絕對量往往比一個細(xì)胞中核酸的絕對量還少，所以操作中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸絕對量很少，不能使用電泳和測 OD 檢測，只能通過PCR 或 RT-PCR 檢測，而 PCR 或 RT-PCR 的條件又需要優(yōu)化，所以要確定提取是否成功十分不容易。
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