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黑色素切片染色試劑盒(Dopa 法)

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 產品簡介:

黑色素在黑色素母細胞內合成。黑色素母細胞起源于神經嵴,在胚胎發育過程中,由神經嵴移行到皮膚、眼和中樞神經系統。因此,在正常情況下皮膚的表皮、毛囊、眼的虹膜、睫狀體、脈絡膜腦的軟腦膜、黑質、迷走背核,以及交感神經節和脊神經節的節細胞內均可有黑色素沉著。在病理情況下可能在全身各處含有黑色索沉著物。黑色素在顯微鏡下通常不呈黑色,而望黃棕色或棕褐色,其顆粒大小不一。黑色素染色可以用于黑色素的診斷,包括檢測神經黑色素、假性黑變病色素等。Dopa 黑色素反應法為經過 Laidlaw 修正之 Bloch 法(1932 年)。此法要求采取新鮮組織或組織固定于 5%甲醛液(至多固定 2-3h)。用冰凍切片,為預防反應作用受影響,冰凍切片浸水時間不超過數秒鐘。

本試劑盒根據 Dopa 黑色素反應法的原理開發,具有下列特點:

1. 即開即用,操作簡單。
2. 本試劑盒可用于切片的顯色檢測。
3. 產品穩定性好、可以長期保存、不易產生沉淀。
4. 本產品足夠染色 250 張切片。
5. 本產品只用于科研
操作步驟:
1. 臨用時取 1.2ml 黑色素切片染色溶液 A 及 0.4ml 黑色素切片染色溶液 B 與5ml 黑色素切片染色溶 C 混合,即成染液。在一定的溫度中,反應速度以 pH值為轉移。當 pH 值為 7.4,溫度 37.5℃時,則反應在 4-5h 內完成。若于配制染液時改用 1ml 黑色素切片染色溶液 B,則 pH 值為 7.7;若完全不用黑色素切片染色溶液 B,則 pH 值在 8.2,在此堿性溶液中,溫度不變則反應在 1h內完成。但此加速法促成組織濃染,用緩慢反應可靠。基于上述原因,使用微量堿性的玻璃皿器亦有濃染趨勢,使用微量酸性者則不發生反應。因此所用一切器皿必須沒有酸堿性反應,絕對保持器皿清潔。
2. 浸切片于混合好的染液中約 30min,溫度 37.5℃。
3. 更換 1 次染液(預先貯藏在冰箱中)。
4. 每 30min 鏡檢 1 次,2-3h 后染液變紅色,3-4h 后染液變棕色,表明切片染色適宜。
5. 水洗。
6. 95%乙醇、無水乙醇脫水,二甲苯透明,封固(人工膠最好)。
7. 結果:Dopa 陽性反應細胞漿(黑素母細胞及白細胞)呈灰色至黑色,黑素不改變顏色,膠原纖維無色或成淺灰色

 

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