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重組λ蛋白磷酸酶

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產品編號bs-47228P
英文名稱Recombinant Lambda Protein Phosphatase, His
中文名稱重組λ蛋白磷酸酶
別    名Lambda Protein Phosphatase; Protein Phosphatase, Lambda, Recombinant, E. coli; Recombinant Lambda Protein Phosphatase, His  λ 蛋白磷酸酶;
理論分子量26kDa
檢測分子量26 kDa
性    狀Liquid
濃    度>0.5 mg/ml
物    種N/A
序    列1-221/221
純    度>95% as determined by SDS-PAGE
純化方法AC
內毒素Not analyzed
表達系統E.coli
活性Yes
標簽His
緩 沖 液50 mM This-HCl (pH=7.5) with 100 mM NaCl, 0.1 mM MnCl2, 0.1 mM EGTA, 2 M dithiothreitol (DTT), 0.01% Brij35 and 50% (v/v) Glycerol.
保存條件Stored at -70℃ or -20℃. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產品介紹產品簡介:
重組λ蛋白磷酸酶 (Recombinant Lambda Protein Phosphatase) 是一種錳離子(Mn2+)依賴的重組表達純化的磷酸蛋白酶,可以對磷酸化的絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和組氨酸殘基進行脫磷酸反應。重組λ蛋白磷酸酶是大腸桿菌表達的帶His標簽的含有221個氨基酸殘基重組蛋白。
重組λ蛋白磷酸酶可以用于蛋白的去磷酸化,從而可以用于研究蛋白磷酸化與其活性和結構的關系,以及驗證蛋白磷酸化位點抗體的特異性等。
酶活性單位定義:在30℃ pH7.5條件下反應1分鐘,能夠水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定義為一個活性單位。

使用說明:
1. Lambda Protein Phosphatase對不同蛋白的脫磷酸化反應有不同活性,所以在實際應用中,建議對酶濃度和反應時間進行優化。反應體系中,反應緩沖液為1× Lambda Protein Phosphatase Buffer并且同時加入1× MnCl2 (最終濃度為1mM)。
2. 以一般的去磷酸化反應為例:在50μl反應體系中,100U的Lambda Protein Phosphatase在30分鐘內可以除去相當于5μM的磷酸化的蛋白(單磷酸化)中約100%的磷酸。

注意事項:
1. 避免反復凍融,為方便后續使用建議適當分裝后保存。
2. 相關抑制劑:10mM釩離子 (vanadate ions) 能抑制Lambda Protein Phosphatase活性約90%,50mM EDTA可以抑制Lambda Protein Phosphatase活性約95%,1% Triton X-100、0.4% Nonidet P-40、0.025% Tween 20、0.5M NaCl、0.1mM ATP、10μg/ml pepstatin A、10μg/ml leupeptin, 10μg/ml aprotinin, 0.5mM PMSF、1mM benzamidine不影響Lambda Protein Phosphatase的酶活性。
3. 該酶的最佳反應溫度是30℃。
4. 某些樣品的粗提液中使用該酶進行去磷酸化處理時,請縮短操作時間,同時添加適量蛋白酶抑制劑以減少目的蛋白的降解。

產品圖片
The purity of the protein is greater than 90% as determined by reducing SDS-PAGE.
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