【預(yù)期用途】
α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）測定試劑盒（連續(xù)監(jiān)測法）用于血清中 α—羥丁酸脫氫酶（HBDH）活性的定量測定。α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）增高常見于
心肌梗死患者、活動性風(fēng)濕性心肌炎和溶血性貧血等疾病。
【檢驗(yàn)原理】
- + +
nm
HBDH NADH H + α酮丁酸 α-羥丁酸 NAD + ¾¾¾
在340 處測定NADH降低速率，計(jì)算出HBDH活性。
【試劑組成：】
試劑 規(guī)格裝量 成分 終濃度
R1 65mL×2 瓶
磷酸鹽緩沖液 50mmol/L
α-酮丁酸 3mmol/L
R2 70mL×1 瓶 還原型輔酶 I（NADH） 0.18mmol/L
【儲存條件及有效期】
試劑和標(biāo)準(zhǔn)品 2～8℃可穩(wěn)定一年。夏季運(yùn)輸注意冷藏，不得冷凍。試劑開瓶后，2～8℃保存 1 周。
【樣本要求】
血清。采血后應(yīng)及時(shí)分離。血清 2-8℃可以保存 3 天，-20 冷凍保存可放 1 周。
【檢驗(yàn)方法】
〇 生化分析儀操作
1、主要性能參數(shù)
主波長 340nm 反應(yīng)方法 速率法 反應(yīng)溫度 37℃輔助波長 415nm 反應(yīng)方向 向下 樣本用量 6μLR1 試劑用量 200μL R2 試劑用量 100μL 校正方法 兩點(diǎn)定標(biāo)血清+R1時(shí)間 5 分鐘 反應(yīng)時(shí)間 1 分鐘 測定時(shí)間 2 分鐘〇 紫外分光光度計(jì)操作
空白 測定
試劑一（μL） 600 600
蒸餾水（μL） 18
標(biāo)本（μL） 18
混勻，37℃孵育 5 分鐘
試劑二（μL） 300 300
混勻，37℃孵育 1 分鐘，波長 340nm，1cm 光徑 4mm 內(nèi)徑石英
比色皿，蒸餾水校零，連續(xù)監(jiān)測 2 分鐘吸光度變化，計(jì)算△A/min
【計(jì)算結(jié)果】HBDH 活力(U/L)=（△A 測定/min-△A 空白/min）×F
F =( ) 1000( ) 1.0mlml
´
´ ´
反應(yīng)總體積樣品體積 毫摩爾消光系數(shù)
注：1000=U/mL 到 U/L 的轉(zhuǎn)換系數(shù)；1.0=比色皿光徑NADH 在 340nm 處的毫摩爾消光系數(shù)：6.22
【參考值范圍】
72～182 U/L（建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值范圍）
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
試劑空白吸光度：A340nm(1.0cm) ≥ 1.1。
試劑空白吸光度變化率：△A340nm(1.0cm)/min ≤0.002。
線性范圍：10～1000U/L(判斷依據(jù)：r2 ≥ 0.99)。
準(zhǔn)確度：相對偏差≤10%。
精密度：批內(nèi) CV≤5.0%；批間差＜10%。
【注意事項(xiàng)】
1、本試劑盒僅供科研使用，若不慎將試劑濺到皮膚，眼睛等，必須用清水沖洗，誤食須到醫(yī)院治療。
2、若儀器沒有試劑盒所要求波長，請選擇接近波長。
3、樣本與試劑量可根據(jù)需要按比例調(diào)節(jié)；不同批次試劑不可混合使用。
心肌梗死患者、活動性風(fēng)濕性心肌炎和溶血性貧血等疾病。
【檢驗(yàn)原理】
- + +
nm
HBDH NADH H + α酮丁酸 α-羥丁酸 NAD + ¾¾¾
在340 處測定NADH降低速率，計(jì)算出HBDH活性。
【試劑組成：】
試劑 規(guī)格裝量 成分 終濃度
R1 65mL×2 瓶
磷酸鹽緩沖液 50mmol/L
α-酮丁酸 3mmol/L
R2 70mL×1 瓶 還原型輔酶 I（NADH） 0.18mmol/L
【儲存條件及有效期】
試劑和標(biāo)準(zhǔn)品 2～8℃可穩(wěn)定一年。夏季運(yùn)輸注意冷藏，不得冷凍。試劑開瓶后，2～8℃保存 1 周。
【樣本要求】
血清。采血后應(yīng)及時(shí)分離。血清 2-8℃可以保存 3 天，-20 冷凍保存可放 1 周。
【檢驗(yàn)方法】
〇 生化分析儀操作
1、主要性能參數(shù)
主波長 340nm 反應(yīng)方法 速率法 反應(yīng)溫度 37℃輔助波長 415nm 反應(yīng)方向 向下 樣本用量 6μLR1 試劑用量 200μL R2 試劑用量 100μL 校正方法 兩點(diǎn)定標(biāo)血清+R1時(shí)間 5 分鐘 反應(yīng)時(shí)間 1 分鐘 測定時(shí)間 2 分鐘〇 紫外分光光度計(jì)操作
空白 測定
試劑一（μL） 600 600
蒸餾水（μL） 18
標(biāo)本（μL） 18
混勻，37℃孵育 5 分鐘
試劑二（μL） 300 300
混勻，37℃孵育 1 分鐘，波長 340nm，1cm 光徑 4mm 內(nèi)徑石英
比色皿，蒸餾水校零，連續(xù)監(jiān)測 2 分鐘吸光度變化，計(jì)算△A/min
【計(jì)算結(jié)果】HBDH 活力(U/L)=（△A 測定/min-△A 空白/min）×F
F =( ) 1000( ) 1.0mlml
´
´ ´
反應(yīng)總體積樣品體積 毫摩爾消光系數(shù)
注：1000=U/mL 到 U/L 的轉(zhuǎn)換系數(shù)；1.0=比色皿光徑NADH 在 340nm 處的毫摩爾消光系數(shù)：6.22
【參考值范圍】
72～182 U/L（建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值范圍）
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
試劑空白吸光度：A340nm(1.0cm) ≥ 1.1。
試劑空白吸光度變化率：△A340nm(1.0cm)/min ≤0.002。
線性范圍：10～1000U/L(判斷依據(jù)：r2 ≥ 0.99)。
準(zhǔn)確度：相對偏差≤10%。
精密度：批內(nèi) CV≤5.0%；批間差＜10%。
【注意事項(xiàng)】
1、本試劑盒僅供科研使用，若不慎將試劑濺到皮膚，眼睛等，必須用清水沖洗，誤食須到醫(yī)院治療。
2、若儀器沒有試劑盒所要求波長，請選擇接近波長。
3、樣本與試劑量可根據(jù)需要按比例調(diào)節(jié)；不同批次試劑不可混合使用。
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