哺乳動物細胞蛋白表達增強質粒pVAI RNA是一種通過表達Virus associated RNA I (VAI RNA)以抑制PKR被dsRNA激活，從而在哺乳動物細胞質粒轉染或病毒感染時促進目的蛋白翻譯和表達的輔助質粒。pVAI RNA也可以用于在慢病毒包裝時，通過增強病毒外殼蛋白的表達，從而提高病毒的產量。pVAI RNA質粒帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性基因，可利用其氨芐青霉素抗性轉化大腸桿菌后篩選陽性克隆。
哺乳動物細胞轉染質粒或感染病毒表達目的蛋白時，經常遇到目的蛋白表達量偏低的情況。細胞轉染質粒或感染病毒后，通常會轉錄生成大量的RNA，其中部分會形成雙鏈RNA (dsRNA)，dsRNA會激活蛋白激酶R (Protein kinase R, PKR，也稱作DAI、p68 kinase、dsI、PKds、P1/eIF2α protein kinase)。PKR是哺乳動物細胞抗病毒防御系統的關鍵酶之一，被dsRNA激活的PKR可以磷酸化轉錄起始因子eIF-2α (Eukaryotic initiation factor 2α)，從而抑制mRNA的翻譯和蛋白的表達[1]。pVAI RNA與帶有目的基因的表達質粒共同轉染哺乳動物細胞時，細胞中的RNA聚合酶III (RNA polymerase III)能夠轉錄pVAI RNA質粒上的腺病毒編碼的病毒相關RNA (Virus associated RNA I, VAI RNA)，VAI RNA能夠與PKR結合并抑制其被dsRNA激活，從而增強目的蛋白的表達[2-3]。VAI RNA也被發現可以用于在慢病毒包裝時提高包裝產生的病毒滴度[4]。VAI RNA促進蛋白翻譯和表達的工作原理如下圖所示。
圖1. pAVI RNA (哺乳動物細胞蛋白表達增強質粒)工作原理圖。
pVAI RNA與表達質粒共轉染哺乳動物細胞增強目的蛋白表達水平的效果取決于多種參數，包括細胞類型、轉染方法和pVAI RNA載體與表達質粒的使用比例(建議1:10-1:1)等。這些參數的優化對獲得比較理想的增強至關重要。
pVAI RNA質粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| Adenovirus type 2 genome | 1-1724 |
| Adenovirus VAI RNA gene | 780-939 |
| Adenovirus VAII RNA gene | 1036-1198 |
| lac operator | 1767-1783 |
| lac promoter | 1791-1821 |
| CAP binding site | 1836-1857 |
| ori | 2145-2733 |
| Ampicillin resistance gene | 2904-3764 |
| Ampicillin promoter | 3765-3869 |
哺乳動物細胞蛋白表達增強質粒pVAI RNA質粒(4392bp)的圖譜如下：
pVAI RNA質粒中推薦使用的測序引物序列如下：
M13-F (4342-4359): 5'-TGTAAA ACGACGGCCAGT-3'
M13-R (1742-1759): 5'-CAGGAA ACAGCT ATGACC-3'
pVAI RNA的全序列信息:D3019 pVAI RNA-全長序列.txt。請聯系客服發送。
包裝清單：
| 產品名稱 | 包裝 | |
| pVAI RNA (哺乳動物細胞蛋白表達增強質粒) | 1µg | |
| pVAI RNA (哺乳動物細胞蛋白表達增強質粒) | 100µg | |
| 說明書 | 1份 |
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