1. 產(chǎn)品名稱：大鼠精原干細胞
2. 組織來源：睪丸組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105 cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4. 細胞簡介：
大鼠精原干細胞分離自睪丸組織；精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞，是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些獨特優(yōu)勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節(jié)機制的深入研究，精子發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染，異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內，精子發(fā)生時一個受高度調控和持續(xù)的過程，精原干細胞（SSCs）一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量，另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至最后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發(fā)生的最原始細胞，也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立，在生物學、醫(yī)學、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內唯一能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。
本公司生產(chǎn)的大鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化，結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×105 cells/瓶；細胞經(jīng)Oct-4、c-Kit免疫熒光鑒定，純度可達85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息：
DMEM-F12、FBS、bFGF、GDNF、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用大鼠精原干細胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)大鼠精原干細胞的培養(yǎng)基。
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
在技術部標準操作流程下，大鼠精原干細胞可傳1-2代左右，隨著傳代次數(shù)的增加，細胞會呈現(xiàn)老化狀態(tài)，生長速度減緩，1代以內細胞狀態(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐�別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考
