細胞名稱	人視網膜微血管內皮細胞-永生化
貨號	YS0884
種屬	人
組織來源	視網膜
永生化方法	轉入 Sv40 和 hTERT 基因
生長方式	貼壁
安全性	所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護
培養	培養基：內皮細胞專用培養液
	配套培養基：（YS-1304）
	溫度：37℃
	氣相：95%空氣，5%二氧化碳
傳代	收到細胞后，請對細胞培養瓶外表進行消毒，將細胞置于培養箱中進行 1-2 小時的緩
	沖，待細胞恢復基本生長狀態后，進行后續細胞實驗。
	在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
	（一）細胞未長至 85%時，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到生物操作臺內，嚴格無
	菌操作，打開細胞培養瓶，若培養瓶上無特殊標注，吸去剩余培養液，只留 6-8ml培
	養液繼續培養。
	（二）細胞已長滿（達 85-95%）。即可進行傳代，具體步驟如下：
	1.棄去培養液，用 PBS 洗滌 1-2 次，
	2.加入 1.0ml 胰酶消化液，37℃消化，顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞回縮變圓、
	透亮、輕拍甁壁呈流沙樣脫落，則迅速拿回操作臺，加入雙倍的含 10%血清的完全培
	養液，終止消化并輕輕吹打細胞，使其變成單細胞懸液，
	3.將細胞收集于離心管中離心 1000rmp/5min，棄上清，輕彈管底，將細胞彈散，
	4.加入新鮮培養液重懸細胞，進行傳代、凍存，
	5.如果沒有特別說明，建議收到細胞后的第一次傳代比例為 1:2。
	注：1.觀察細胞密度最好用（4X物鏡）低倍鏡觀察，以便正確的判斷細胞密度；觀
	察細胞形態請用（10X 或 20X）高倍鏡觀察；
	2.瓶中運輸的培養液不能重復使用，請換新鮮培養液培養；
	3.有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心重懸后接種到新瓶內；
	4.收到細胞后，若發現培養瓶破損、漏液及細胞污染，請及時與我們聯系。
保存	凍存條件：70%基礎培養液+20%胎牛血清+10%DMSO  保存條件：液氮存儲
供應限制	僅供研究之用
常見問題	1.培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師
及	解決。
解決方案