細(xì)胞來(lái)源
JCRB
凍存條件
無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001)
細(xì)胞描述
HSC-3 細(xì)胞系是從一名 63 歲男性患者的舌鱗狀細(xì)胞癌起源的轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)腫瘤中建立的。從新鮮的外植腫瘤組織中收集遷移和增殖的上皮細(xì)胞并進(jìn)行傳代培養(yǎng),大多數(shù)報(bào)告表明,皮下接種到裸鼠體內(nèi)的人上皮腫瘤轉(zhuǎn)移是相當(dāng)罕見(jiàn)的。HSC-3 是一種人類口腔鱗狀癌細(xì)胞系,當(dāng)皮下移植到裸鼠體內(nèi)時(shí),它會(huì)在引流淋巴結(jié)中形成轉(zhuǎn)移灶。來(lái)自 HSC-3 的條件培養(yǎng)基已顯示可促進(jìn)血管生成,HSC-3 細(xì)胞具有顯著升高的生長(zhǎng)因子分泌水平。該細(xì)胞系的高度侵襲性特征使 HSC-3 成為研究轉(zhuǎn)移性鱗狀細(xì)胞癌的高引用模型。
本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。
培養(yǎng)備注
用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過(guò)渡培養(yǎng)
T25 細(xì)胞到貨處理
觀察: 1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)及時(shí)核對(duì)培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱是否與訂購(gòu)的細(xì)胞名稱一致以及培養(yǎng) 瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理: 1、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前 三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。
3、不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀 態(tài)。
4、收到細(xì)胞后,及時(shí)查看說(shuō)明書(shū)是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞 的傳代方法操作。
貼壁:未超過(guò) 80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留 5ml 完全培養(yǎng)基, 放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng);超過(guò) 80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見(jiàn)細(xì)胞 培養(yǎng)步驟。首次傳代,建議 1:2 傳代(兩個(gè) T25)。
(傳代時(shí)建議一瓶用原瓶里面的完全培 養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)。)
特殊細(xì)胞注意事項(xiàng):個(gè)別細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正常現(xiàn)象。 請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對(duì)比培養(yǎng)使用),
沉淀加入胰酶 1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再 離心,棄上清,加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè) T25),補(bǔ) 充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)